病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
2004年
4期
291-297
,共7页
罗文新%李利峰%许辰煜%程通%管宝全%张军%夏宁邵
囉文新%李利峰%許辰煜%程通%管寶全%張軍%夏寧邵
라문신%리리봉%허신욱%정통%관보전%장군%하저소
戊型肝炎病毒%嵌合抗体%真核表达
戊型肝炎病毒%嵌閤抗體%真覈錶達
무형간염병독%감합항체%진핵표체
通过RT-PCR方法从分泌戊型肝炎(戊肝)病毒中和性鼠源单克隆抗体(单抗)8C11的杂交瘤细胞中克隆出抗体基因的重链可变区(VH)、轻链可变区(VK)序列,并分别克隆到含有人gamma 1重链和kappa轻链恒定区序列的pcDNA3.1/Hygro和pcDNA3.1(+)质粒中,共转染中华仓鼠卵巢癌细胞(CHO)细胞.RT-PCR结果表明,转染的CHO细胞转录了嵌合重链及轻链基因,间接ELISA及Western blot结果表明:翻译出的两种多肽在细胞内正确组装成嵌合抗体分子,并可分泌至细胞外,表达的嵌合抗体保留了原鼠单抗的抗原结合特异性及对8H3结合抗原的增强作用.8C11嵌合抗体的成功表达可降低鼠源性,为探讨戊肝抗体治疗的可能性奠定了基础.
通過RT-PCR方法從分泌戊型肝炎(戊肝)病毒中和性鼠源單剋隆抗體(單抗)8C11的雜交瘤細胞中剋隆齣抗體基因的重鏈可變區(VH)、輕鏈可變區(VK)序列,併分彆剋隆到含有人gamma 1重鏈和kappa輕鏈恆定區序列的pcDNA3.1/Hygro和pcDNA3.1(+)質粒中,共轉染中華倉鼠卵巢癌細胞(CHO)細胞.RT-PCR結果錶明,轉染的CHO細胞轉錄瞭嵌閤重鏈及輕鏈基因,間接ELISA及Western blot結果錶明:翻譯齣的兩種多肽在細胞內正確組裝成嵌閤抗體分子,併可分泌至細胞外,錶達的嵌閤抗體保留瞭原鼠單抗的抗原結閤特異性及對8H3結閤抗原的增彊作用.8C11嵌閤抗體的成功錶達可降低鼠源性,為探討戊肝抗體治療的可能性奠定瞭基礎.
통과RT-PCR방법종분비무형간염(무간)병독중화성서원단극륭항체(단항)8C11적잡교류세포중극륭출항체기인적중련가변구(VH)、경련가변구(VK)서렬,병분별극륭도함유인gamma 1중련화kappa경련항정구서렬적pcDNA3.1/Hygro화pcDNA3.1(+)질립중,공전염중화창서란소암세포(CHO)세포.RT-PCR결과표명,전염적CHO세포전록료감합중련급경련기인,간접ELISA급Western blot결과표명:번역출적량충다태재세포내정학조장성감합항체분자,병가분비지세포외,표체적감합항체보류료원서단항적항원결합특이성급대8H3결합항원적증강작용.8C11감합항체적성공표체가강저서원성,위탐토무간항체치료적가능성전정료기출.
