CAJ | 학술논문

目的探讨小鼠脾脏CD4+T细胞的分离方法,观察钩吻素子(Kou)对小鼠脾脏CD4+T细胞体外增殖的影响.方法以免疫磁珠分选法从小鼠脾脏细胞中分离CD4+T细胞,流式细胞术检测所得细胞的纯度,台盼蓝法检测细胞活力.将10～320μg/ml Kou分别作用于经刀豆蛋白A或植物血凝素刺激的小鼠T淋巴细胞,四唑盐比色法检测细胞增殖情况,用酶联免疫法检测细胞上清中IL-2的含量.结果经过流式细胞仪测定分离后的小鼠脾脏CD4+T细胞纯度达到90.3%±5.8%:0.2%台盼兰染色细胞活力为94.9%±3.6%;增殖试验表明分离后未加Kou的CD4+T细胞对刀豆蛋白A、植物血凝素的刺激保持了良好的增殖能力,当浓度范围为20～320μg/ml时,Kou均能抑制淋巴细胞的增殖(P＜0.05),且表现出一定的剂量相关性;不同浓度的Kou(20、100、200μgm1)作用后,CD4+T细胞培养上清中的IL-2水平明显低于对照组(P＜0.05).结论免疫磁珠阴性分选法操作简单、快速,可获得较高纯化率、有活性的CD4+T细胞;Kou明显抑制小鼠CD4+T淋巴细胞增殖反应,此抑制作用可能与Kou抑制小鼠CD4+T细胞IL-2的分泌及免疫抑制作用相关.
목적탐토소서비장CD4+T세포적분리방법,관찰구문소자(Kou)대소서비장CD4+T세포체외증식적영향.방법이면역자주분선법종소서비장세포중분리CD4+T세포,류식세포술검측소득세포적순도,태반람법검측세포활력.장10～320μg/ml Kou분별작용우경도두단백A혹식물혈응소자격적소서T림파세포,사서염비색법검측세포증식정황,용매련면역법검측세포상청중IL-2적함량.결과경과류식세포의측정분리후적소서비장CD4+T세포순도체도90.3%±5.8%:0.2%태반란염색세포활력위94.9%±3.6%;증식시험표명분리후미가Kou적CD4+T세포대도두단백A、식물혈응소적자격보지료량호적증식능력,당농도범위위20～320μg/ml시,Kou균능억제림파세포적증식(P＜0.05),차표현출일정적제량상관성;불동농도적Kou(20、100、200μgm1)작용후,CD4+T세포배양상청중적IL-2수평명현저우대조조(P＜0.05).결론면역자주음성분선법조작간단、쾌속,가획득교고순화솔、유활성적CD4+T세포;Kou명현억제소서CD4+T림파세포증식반응,차억제작용가능여Kou억제소서CD4+T세포IL-2적분비급면역억제작용상관.