天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2006年
2期
105-107
,共3页
何庆%苏京%刘铭%王保平%王晶%陈克勤%尹潍
何慶%囌京%劉銘%王保平%王晶%陳剋勤%尹濰
하경%소경%류명%왕보평%왕정%진극근%윤유
基因,bcl-2质粒基因%DNA,重组%转染%免疫印迹法
基因,bcl-2質粒基因%DNA,重組%轉染%免疫印跡法
기인,bcl-2질립기인%DNA,중조%전염%면역인적법
目的:构建抗凋亡基因bcl-2的哺乳动物细胞表达型质粒并转染哺乳动物细胞293T细胞.方法:利用基因重组技术,将bcl-2全编码cDNA序列,导入pCMV-Tag1表达型质粒;应用磷酸钙共沉淀技术,将其转染293T细胞;并利用免疫沉淀和Western blotting技术检测Bcl-2融合蛋白的表达.结果:bcl-2全编码cDNA序列成功导入pCMV-Tag1表达型质粒;在转染后的293T细胞成功地检测出bcl-2融合蛋白的表达,融合蛋白大小与预期完全一致.结论:该表达型质粒可以成功转染哺乳动物细胞,为对胰岛细胞的转染奠定了基础.
目的:構建抗凋亡基因bcl-2的哺乳動物細胞錶達型質粒併轉染哺乳動物細胞293T細胞.方法:利用基因重組技術,將bcl-2全編碼cDNA序列,導入pCMV-Tag1錶達型質粒;應用燐痠鈣共沉澱技術,將其轉染293T細胞;併利用免疫沉澱和Western blotting技術檢測Bcl-2融閤蛋白的錶達.結果:bcl-2全編碼cDNA序列成功導入pCMV-Tag1錶達型質粒;在轉染後的293T細胞成功地檢測齣bcl-2融閤蛋白的錶達,融閤蛋白大小與預期完全一緻.結論:該錶達型質粒可以成功轉染哺乳動物細胞,為對胰島細胞的轉染奠定瞭基礎.
목적:구건항조망기인bcl-2적포유동물세포표체형질립병전염포유동물세포293T세포.방법:이용기인중조기술,장bcl-2전편마cDNA서렬,도입pCMV-Tag1표체형질립;응용린산개공침정기술,장기전염293T세포;병이용면역침정화Western blotting기술검측Bcl-2융합단백적표체.결과:bcl-2전편마cDNA서렬성공도입pCMV-Tag1표체형질립;재전염후적293T세포성공지검측출bcl-2융합단백적표체,융합단백대소여예기완전일치.결론:해표체형질립가이성공전염포유동물세포,위대이도세포적전염전정료기출.
