上海农业学报
上海農業學報
상해농업학보
ACTA AGRICULTURAE SHANGHAI
2006年
4期
18-21
,共4页
姜法铭%曹海军%朱志盈%姚惠娟%樊生超%华修国%崔立%缪德年
薑法銘%曹海軍%硃誌盈%姚惠娟%樊生超%華脩國%崔立%繆德年
강법명%조해군%주지영%요혜연%번생초%화수국%최립%무덕년
猪IgG%H链基因%CH2-CH3%基因克隆%DNA序列分析
豬IgG%H鏈基因%CH2-CH3%基因剋隆%DNA序列分析
저IgG%H련기인%CH2-CH3%기인극륭%DNA서렬분석
根据已发表的猪IgG H链序列,设计了1对通用引物,从猪外周血淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增IgGH链基因CH2-CH3序列,并克隆入pMD18-T Simple载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,经SalⅠ和Xba Ⅰ双酶切鉴定,筛选出阳性克隆.核酸序列测定分析表明,IgG H链基因CH2-CH3序列全长为669 bp,编码CH2-CH3的221个氨基酸和J区的1个脯氨酸.利用DNASTAR软件将其与猪IgG H链各CH2-CH3序列进行比较,发现其与U03778-1、U03779-2a、U03780-2b、U03781-3、U03782-4的核苷酸序列同源率分别为92.1%、98.4%、98.5%、93.0%和97.2%,推导的氨基酸序列同源率分别为86.5%、96.4%、96.5%、87.0%和94.2%.经进化树分析提示,该序列可能为一个新的亚型.
根據已髮錶的豬IgG H鏈序列,設計瞭1對通用引物,從豬外週血淋巴細胞提取總RNA,經RT-PCR擴增IgGH鏈基因CH2-CH3序列,併剋隆入pMD18-T Simple載體,轉化大腸桿菌DH5α感受態細胞,經SalⅠ和Xba Ⅰ雙酶切鑒定,篩選齣暘性剋隆.覈痠序列測定分析錶明,IgG H鏈基因CH2-CH3序列全長為669 bp,編碼CH2-CH3的221箇氨基痠和J區的1箇脯氨痠.利用DNASTAR軟件將其與豬IgG H鏈各CH2-CH3序列進行比較,髮現其與U03778-1、U03779-2a、U03780-2b、U03781-3、U03782-4的覈苷痠序列同源率分彆為92.1%、98.4%、98.5%、93.0%和97.2%,推導的氨基痠序列同源率分彆為86.5%、96.4%、96.5%、87.0%和94.2%.經進化樹分析提示,該序列可能為一箇新的亞型.
근거이발표적저IgG H련서렬,설계료1대통용인물,종저외주혈림파세포제취총RNA,경RT-PCR확증IgGH련기인CH2-CH3서렬,병극륭입pMD18-T Simple재체,전화대장간균DH5α감수태세포,경SalⅠ화Xba Ⅰ쌍매절감정,사선출양성극륭.핵산서렬측정분석표명,IgG H련기인CH2-CH3서렬전장위669 bp,편마CH2-CH3적221개안기산화J구적1개포안산.이용DNASTAR연건장기여저IgG H련각CH2-CH3서렬진행비교,발현기여U03778-1、U03779-2a、U03780-2b、U03781-3、U03782-4적핵감산서렬동원솔분별위92.1%、98.4%、98.5%、93.0%화97.2%,추도적안기산서렬동원솔분별위86.5%、96.4%、96.5%、87.0%화94.2%.경진화수분석제시,해서렬가능위일개신적아형.
