农药学学报
農藥學學報
농약학학보
CHINESE JOURNAL OF PESTICIDE SCIENCE
2007年
1期
54-58
,共5页
陆秀君%郝会海%宋萍%杜克久%李国勋
陸秀君%郝會海%宋萍%杜剋久%李國勛
륙수군%학회해%송평%두극구%리국훈
苏云金杆菌%营养期杀虫蛋白%活性%Vip3A-LS1基因克隆
囌雲金桿菌%營養期殺蟲蛋白%活性%Vip3A-LS1基因剋隆
소운금간균%영양기살충단백%활성%Vip3A-LS1기인극륭
对营养期高活性杀虫菌株进行筛选,得到高效菌株Bt LS1,对其营养期杀虫蛋白活性及发酵特性进行了系统研究,克隆了该菌株的vip3A新基因.测定了31株vip3A基因阳性菌株营养期杀虫蛋白的活性,发现Bt LS1和Bt LS8菌株对甜菜夜蛾Spodoptera exigua生长的抑制作用明显高于其他菌株.进一步研究表明,Bt LS1菌株营养期杀虫蛋白对初孵和2龄甜菜夜蛾幼虫的体重增长抑制率分别为95.3% ±2.1%和90.7% ±6.6%;对棉铃虫Helicoverpa armigera初孵幼虫的校正死亡率为22.1%,对2龄幼虫的体重增长抑制率为78.7% ±6.6%.发酵液中以胞内可溶性物质为主.设计vip3A全长基因特异引物PCR扩增,插入质粒pBluescript SK(+),克隆测序证实该菌株中存在vip3A新基因,命名为Vip3A-LS1,GenBank登录号为DQ016968.按该序列推断的蛋白与同类蛋白的8个氨基酸之间存在差异.
對營養期高活性殺蟲菌株進行篩選,得到高效菌株Bt LS1,對其營養期殺蟲蛋白活性及髮酵特性進行瞭繫統研究,剋隆瞭該菌株的vip3A新基因.測定瞭31株vip3A基因暘性菌株營養期殺蟲蛋白的活性,髮現Bt LS1和Bt LS8菌株對甜菜夜蛾Spodoptera exigua生長的抑製作用明顯高于其他菌株.進一步研究錶明,Bt LS1菌株營養期殺蟲蛋白對初孵和2齡甜菜夜蛾幼蟲的體重增長抑製率分彆為95.3% ±2.1%和90.7% ±6.6%;對棉鈴蟲Helicoverpa armigera初孵幼蟲的校正死亡率為22.1%,對2齡幼蟲的體重增長抑製率為78.7% ±6.6%.髮酵液中以胞內可溶性物質為主.設計vip3A全長基因特異引物PCR擴增,插入質粒pBluescript SK(+),剋隆測序證實該菌株中存在vip3A新基因,命名為Vip3A-LS1,GenBank登錄號為DQ016968.按該序列推斷的蛋白與同類蛋白的8箇氨基痠之間存在差異.
대영양기고활성살충균주진행사선,득도고효균주Bt LS1,대기영양기살충단백활성급발효특성진행료계통연구,극륭료해균주적vip3A신기인.측정료31주vip3A기인양성균주영양기살충단백적활성,발현Bt LS1화Bt LS8균주대첨채야아Spodoptera exigua생장적억제작용명현고우기타균주.진일보연구표명,Bt LS1균주영양기살충단백대초부화2령첨채야아유충적체중증장억제솔분별위95.3% ±2.1%화90.7% ±6.6%;대면령충Helicoverpa armigera초부유충적교정사망솔위22.1%,대2령유충적체중증장억제솔위78.7% ±6.6%.발효액중이포내가용성물질위주.설계vip3A전장기인특이인물PCR확증,삽입질립pBluescript SK(+),극륭측서증실해균주중존재vip3A신기인,명명위Vip3A-LS1,GenBank등록호위DQ016968.안해서렬추단적단백여동류단백적8개안기산지간존재차이.