热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2008年
1期
53-57
,共5页
蜘蛛毒素基因(ω-ACTX-HV2a)%基因合成%基因突变
蜘蛛毒素基因(ω-ACTX-HV2a)%基因閤成%基因突變
지주독소기인(ω-ACTX-HV2a)%기인합성%기인돌변
蜘蛛毒素(ω-ACTX-Hv2a)是最理想研制成为无公害杀虫剂的昆虫毒素肽之一,但由于其cDNA至今还未被克隆出来;为了进行后续研究工作,笔者选用人工合成的办法进行基因克隆等工作.化学合成4对(Al-、Al+,A2-、A2+,H3-、H3+和H4-、H4+)单链寡核苷酸片段,然后,将片段Al-、Al+、A2-、A2+和片段H3-、H3+、H4-、H4+分别混合后退火连接,形成A和H片段,再将A和H片段在连接酶的作用下,合成全基因Hv2a.经测序可知,合成的Hv2a有5个碱基缺失;利用"循环延伸"的方法,经2次定点突变后,通过克隆测序证明Hv2a全基因序列完全正确,说明这种定点突变的方法是可行的.
蜘蛛毒素(ω-ACTX-Hv2a)是最理想研製成為無公害殺蟲劑的昆蟲毒素肽之一,但由于其cDNA至今還未被剋隆齣來;為瞭進行後續研究工作,筆者選用人工閤成的辦法進行基因剋隆等工作.化學閤成4對(Al-、Al+,A2-、A2+,H3-、H3+和H4-、H4+)單鏈寡覈苷痠片段,然後,將片段Al-、Al+、A2-、A2+和片段H3-、H3+、H4-、H4+分彆混閤後退火連接,形成A和H片段,再將A和H片段在連接酶的作用下,閤成全基因Hv2a.經測序可知,閤成的Hv2a有5箇堿基缺失;利用"循環延伸"的方法,經2次定點突變後,通過剋隆測序證明Hv2a全基因序列完全正確,說明這種定點突變的方法是可行的.
지주독소(ω-ACTX-Hv2a)시최이상연제성위무공해살충제적곤충독소태지일,단유우기cDNA지금환미피극륭출래;위료진행후속연구공작,필자선용인공합성적판법진행기인극륭등공작.화학합성4대(Al-、Al+,A2-、A2+,H3-、H3+화H4-、H4+)단련과핵감산편단,연후,장편단Al-、Al+、A2-、A2+화편단H3-、H3+、H4-、H4+분별혼합후퇴화련접,형성A화H편단,재장A화H편단재련접매적작용하,합성전기인Hv2a.경측서가지,합성적Hv2a유5개감기결실;이용"순배연신"적방법,경2차정점돌변후,통과극륭측서증명Hv2a전기인서렬완전정학,설명저충정점돌변적방법시가행적.
