异体异位发育睾丸组织的蛋白质组图谱构建及差异蛋白分析
이체이위발육고환조직적단백질조도보구건급차이단백분석
Proteome map establishment and differential protein analysis of heterotopic developed testicular tissue
  • 万方数据
    广东医学 엄동의학
    GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
    2009年 3期 357-361 ,共5页

    于洁%廖东江%叶静%张芳婷%龙霞%万汇涓%尹美%杨会林%房家智%蔡志明

    우길%료동강%협정%장방정%룡하%만회연%윤미%양회림%방가지%채지명

    异体异位发育的睾丸组织%双向凝胶电泳%基质辅助电离解析飞行时间质谱 異體異位髮育的睪汍組織%雙嚮凝膠電泳%基質輔助電離解析飛行時間質譜
    이체이위발육적고환조직%쌍향응효전영%기질보조전리해석비행시간질보
    目的 应用蛋白质组学实验方法对在异体异位生长发育的新生小鼠睾丸组织进行差异蛋白分析,从而对睾丸组织体外移植模型用于生精细胞发育研究的可行性提供进一步的理论依据.方法 以新生小鼠睾丸组织为供体,免疫缺陷小鼠为受体进行组织移植,移植8周后收集移植物组织,采用双向凝胶电泳(2-DE)分离移植物组织总蛋白,同时分离8周正常小鼠睾丸组织总蛋白作对比分析,运用ImageMaster 2D Elite 5.0图像分析软件识别移植物组织与正常组织差异表达的蛋白质点,应用基质辅助电离解析飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)获取肽质量指纹图谱(PMF),检索数据库鉴定差异表达的蛋白质点.结果 正常睾丸组织和移植物组织双向电泳图谱的平均蛋白质点数分别为(1326±15)个和(1561±20)个,3次重复实验的蛋白质点位置重复性较好.通过比较两者的双向凝胶电泳图谱,得到表达差异量较大的蛋白质点21个.选取6个仅在正常睾丸组织中有表达的蛋白质点进行质谱和生物信息学分析,鉴定出的6种蛋白质,除血红蛋白α1链(Hbα-α1)外,其他5种蛋白均为在小鼠睾丸中有较高表达的蛋白质,包括A激酶锚定蛋白结合的精子蛋白(ASP)、磷脂过氧化氢物谷胱甘肽过氧化物酶(GPX4)、精子蛋白(Sp17)、天门冬酰胺酶样蛋白(ASRGL1)和过氧化物氧化还原因子4(Prdx4).结论 在本实验中,从异体异位生长发育成熟的新生小鼠睾丸组织中检测到5种在睾丸中特异性高表达蛋白质的缺失,这些蛋白质主要在精子运动、精子顶体形成以及精子的受精等功能中发挥作用.
    목적 응용단백질조학실험방법대재이체이위생장발육적신생소서고환조직진행차이단백분석,종이대고환조직체외이식모형용우생정세포발육연구적가행성제공진일보적이론의거.방법 이신생소서고환조직위공체,면역결함소서위수체진행조직이식,이식8주후수집이식물조직,채용쌍향응효전영(2-DE)분리이식물조직총단백,동시분리8주정상소서고환조직총단백작대비분석,운용ImageMaster 2D Elite 5.0도상분석연건식별이식물조직여정상조직차이표체적단백질점,응용기질보조전리해석비행시간질보(MALDI-TOF-MS)획취태질량지문도보(PMF),검색수거고감정차이표체적단백질점.결과 정상고환조직화이식물조직쌍향전영도보적평균단백질점수분별위(1326±15)개화(1561±20)개,3차중복실험적단백질점위치중복성교호.통과비교량자적쌍향응효전영도보,득도표체차이량교대적단백질점21개.선취6개부재정상고환조직중유표체적단백질점진행질보화생물신식학분석,감정출적6충단백질,제혈홍단백α1련(Hbα-α1)외,기타5충단백균위재소서고환중유교고표체적단백질,포괄A격매묘정단백결합적정자단백(ASP)、린지과양화경물곡광감태과양화물매(GPX4)、정자단백(Sp17)、천문동선알매양단백(ASRGL1)화과양화물양화환원인자4(Prdx4).결론 재본실험중,종이체이위생장발육성숙적신생소서고환조직중검측도5충재고환중특이성고표체단백질적결실,저사단백질주요재정자운동、정자정체형성이급정자적수정등공능중발휘작용.
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