中西医结合心脑血管病杂志
中西醫結閤心腦血管病雜誌
중서의결합심뇌혈관병잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATIVE MEDICINE ON CARDIO-/CEREBROVASCULAR DISEASE
2010年
5期
563-565
,共3页
朱江%刘煜敏%孔朝红%道文欣
硃江%劉煜敏%孔朝紅%道文訢
주강%류욱민%공조홍%도문흔
内皮祖细胞%骨髓%细胞培养
內皮祖細胞%骨髓%細胞培養
내피조세포%골수%세포배양
目的 探索骨髓来源的血管内皮祖细胞的分离培养方法,为缺血性疾病治疗找到新的移植细胞来源.方法 采集SD雄性大鼠骨髓细胞,用梯度密度离心法分离单核个细胞,种植于提前包埋了纤维连接蛋白的培养皿中培养,将血管内皮生长因子(VEGF)、重组纤维细胞生长因子(bFGF)和重组上皮生长因子(EGF)作为诱导剂,将72 h后贴壁细胞(A组)和非贴壁细胞(B组)分别培养,观察细胞形态的变化以及数量变化,取A组在第14天,应用免疫组化和免疫荧光技术鉴定内皮祖细胞系列标志.结果 A组细胞经过体外诱导后大量扩增,在28 d时仍有强大扩增的活力,呈铺路石样,而B组细胞短期内可以大量增殖,呈长索样,之后逐渐变少;在细胞迁移实验中,A组细胞可以相互融合形成血管结构,而B组细胞之间则不能融合,随着时间推移,逐渐凋亡;A组经过CD34免疫荧光、CD133、FLK-1免疫组化鉴定呈阳性,并能特异性吸附FITC-UEA-和内吞DIL-Ac-LDL.结论 自体骨髓细胞通过贴壁换液后可以分离培养出内皮祖细胞,取贴壁细胞经过体外诱导后大量扩增,并通过表面标记物鉴定可以确认为内皮祖细胞,而非贴壁细胞不能大量增殖,故将贴壁分离方法来筛选内皮祖细胞,此方法简易,并能满足细胞移植的需要,因而,在移植治疗脑缺血引起的内皮损伤应该有较好的临床应用前景.
目的 探索骨髓來源的血管內皮祖細胞的分離培養方法,為缺血性疾病治療找到新的移植細胞來源.方法 採集SD雄性大鼠骨髓細胞,用梯度密度離心法分離單覈箇細胞,種植于提前包埋瞭纖維連接蛋白的培養皿中培養,將血管內皮生長因子(VEGF)、重組纖維細胞生長因子(bFGF)和重組上皮生長因子(EGF)作為誘導劑,將72 h後貼壁細胞(A組)和非貼壁細胞(B組)分彆培養,觀察細胞形態的變化以及數量變化,取A組在第14天,應用免疫組化和免疫熒光技術鑒定內皮祖細胞繫列標誌.結果 A組細胞經過體外誘導後大量擴增,在28 d時仍有彊大擴增的活力,呈鋪路石樣,而B組細胞短期內可以大量增殖,呈長索樣,之後逐漸變少;在細胞遷移實驗中,A組細胞可以相互融閤形成血管結構,而B組細胞之間則不能融閤,隨著時間推移,逐漸凋亡;A組經過CD34免疫熒光、CD133、FLK-1免疫組化鑒定呈暘性,併能特異性吸附FITC-UEA-和內吞DIL-Ac-LDL.結論 自體骨髓細胞通過貼壁換液後可以分離培養齣內皮祖細胞,取貼壁細胞經過體外誘導後大量擴增,併通過錶麵標記物鑒定可以確認為內皮祖細胞,而非貼壁細胞不能大量增殖,故將貼壁分離方法來篩選內皮祖細胞,此方法簡易,併能滿足細胞移植的需要,因而,在移植治療腦缺血引起的內皮損傷應該有較好的臨床應用前景.
목적 탐색골수래원적혈관내피조세포적분리배양방법,위결혈성질병치료조도신적이식세포래원.방법 채집SD웅성대서골수세포,용제도밀도리심법분리단핵개세포,충식우제전포매료섬유련접단백적배양명중배양,장혈관내피생장인자(VEGF)、중조섬유세포생장인자(bFGF)화중조상피생장인자(EGF)작위유도제,장72 h후첩벽세포(A조)화비첩벽세포(B조)분별배양,관찰세포형태적변화이급수량변화,취A조재제14천,응용면역조화화면역형광기술감정내피조세포계렬표지.결과 A조세포경과체외유도후대량확증,재28 d시잉유강대확증적활력,정포로석양,이B조세포단기내가이대량증식,정장색양,지후축점변소;재세포천이실험중,A조세포가이상호융합형성혈관결구,이B조세포지간칙불능융합,수착시간추이,축점조망;A조경과CD34면역형광、CD133、FLK-1면역조화감정정양성,병능특이성흡부FITC-UEA-화내탄DIL-Ac-LDL.결론 자체골수세포통과첩벽환액후가이분리배양출내피조세포,취첩벽세포경과체외유도후대량확증,병통과표면표기물감정가이학인위내피조세포,이비첩벽세포불능대량증식,고장첩벽분리방법래사선내피조세포,차방법간역,병능만족세포이식적수요,인이,재이식치료뇌결혈인기적내피손상응해유교호적림상응용전경.
