中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2012年
1期
57-66
,共10页
余洪磊%周巧玲%黄仁发%袁明霞%敖翔%杨敬华
餘洪磊%週巧玲%黃仁髮%袁明霞%敖翔%楊敬華
여홍뢰%주교령%황인발%원명하%오상%양경화
缺氧诱导因子-1α%中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白%缺血再灌注%急性肾损伤%冬虫夏草
缺氧誘導因子-1α%中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白%缺血再灌註%急性腎損傷%鼕蟲夏草
결양유도인자-1α%중성립세포명효매상관지질운재단백%결혈재관주%급성신손상%동충하초
目的:观察大鼠肾缺血再灌注(I/R)后尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinaseassociated lipocalin,NGAL)浓度、肾组织缺氧诱导因子-1 α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1 α)和NGAL的表达以及冬虫夏草(Cordyceps sinensis,C.sinensis)干预后对其的影响,探讨C.sinensis的肾保护作用机制.方法:健康雄性SD大鼠45只随机分为假手术(sham)组、I/R组和C.sinensis组,每组15只.3组组内再按24,48,72h分成3个亚组,每组5只.用摘除右肾后夹闭左肾蒂1h恢复再灌注的方法建立肾I/R模型,sham组摘除右肾后未夹闭左肾蒂,术后每日予以生理盐水(2 mL/d)灌胃,I/R组和C.sinensis组分别在术后予以生理盐水(2 mL/d)和人工C.sinensis粉[5.0 g/(kg· d)]灌胃,在相应时间点处死大鼠.检测各组大鼠血尿素氮(BUN)和血肌酐(SCr),比色法检测各组大鼠的尿中N-乙酰-β-D-氨基酸葡萄糖苷酶(NAG)含量,ELISA法检测各组大鼠尿NGAL浓度,HE染色观察大鼠肾小管间质病理变化,并用肾小管间质半定量计分法分析各组大鼠病理损伤情况,RT-PCR检测各组大鼠肾组织中HIF-1αmRNA的表达水平,免疫荧光共聚焦法观察各组大鼠肾组织HIF-1 α和NGAL蛋白的表达情况.结果:与sham组相比,I/R组和C.sinensis组大鼠的BUN及SCr水平增高(P＜0.05),尿中NAG和NGAL增多(P＜0.05).Sham组大鼠肾小球及小管间质均正常,无明显病理改变；I/R组出现肾小管上皮细胞普遍肿胀,可见小管扩张,管腔管型,刷状缘消失,部分上皮细胞变性坏死等改变,肾小球无明显病理改变.与sham组相比,I/R组和C.sinensis组各时间点大鼠肾组织HIF-1 α的mRNA及蛋白、NGAL蛋白的表达均明显升高(P＜0.05).与I/R组相比较,C.sinensis组各时间点的BUN和SCr水平下降(p＜0.05),尿中NAG和NGAL浓度降低(P＜0.05),肾组织NGAL蛋白的表达下调(P＜0.05),HIF-1α mRNA及其蛋白的表达上调(P＜0.05).肾小管病理半定量计分显示C.sinensis组较I/R组小管间质损伤明显改善.结论:I/R大鼠模型病理改变表现为肾小管及肾间质受损,与急性肾损伤病理改变特征相符合.I/R后尿中NGAL水平增高,与尿中NAG及肾小管间质损伤程度成正相关,提示NGAL可能是急性肾损伤时肾小管损伤特异性的生物标志物.C.sinensis可能通过调节肾组织中HIF-1α和NGAL的表达而达到肾保护作用.
目的:觀察大鼠腎缺血再灌註(I/R)後尿中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(neutrophil gelatinaseassociated lipocalin,NGAL)濃度、腎組織缺氧誘導因子-1 α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1 α)和NGAL的錶達以及鼕蟲夏草(Cordyceps sinensis,C.sinensis)榦預後對其的影響,探討C.sinensis的腎保護作用機製.方法:健康雄性SD大鼠45隻隨機分為假手術(sham)組、I/R組和C.sinensis組,每組15隻.3組組內再按24,48,72h分成3箇亞組,每組5隻.用摘除右腎後夾閉左腎蒂1h恢複再灌註的方法建立腎I/R模型,sham組摘除右腎後未夾閉左腎蒂,術後每日予以生理鹽水(2 mL/d)灌胃,I/R組和C.sinensis組分彆在術後予以生理鹽水(2 mL/d)和人工C.sinensis粉[5.0 g/(kg· d)]灌胃,在相應時間點處死大鼠.檢測各組大鼠血尿素氮(BUN)和血肌酐(SCr),比色法檢測各組大鼠的尿中N-乙酰-β-D-氨基痠葡萄糖苷酶(NAG)含量,ELISA法檢測各組大鼠尿NGAL濃度,HE染色觀察大鼠腎小管間質病理變化,併用腎小管間質半定量計分法分析各組大鼠病理損傷情況,RT-PCR檢測各組大鼠腎組織中HIF-1αmRNA的錶達水平,免疫熒光共聚焦法觀察各組大鼠腎組織HIF-1 α和NGAL蛋白的錶達情況.結果:與sham組相比,I/R組和C.sinensis組大鼠的BUN及SCr水平增高(P＜0.05),尿中NAG和NGAL增多(P＜0.05).Sham組大鼠腎小毬及小管間質均正常,無明顯病理改變；I/R組齣現腎小管上皮細胞普遍腫脹,可見小管擴張,管腔管型,刷狀緣消失,部分上皮細胞變性壞死等改變,腎小毬無明顯病理改變.與sham組相比,I/R組和C.sinensis組各時間點大鼠腎組織HIF-1 α的mRNA及蛋白、NGAL蛋白的錶達均明顯升高(P＜0.05).與I/R組相比較,C.sinensis組各時間點的BUN和SCr水平下降(p＜0.05),尿中NAG和NGAL濃度降低(P＜0.05),腎組織NGAL蛋白的錶達下調(P＜0.05),HIF-1α mRNA及其蛋白的錶達上調(P＜0.05).腎小管病理半定量計分顯示C.sinensis組較I/R組小管間質損傷明顯改善.結論:I/R大鼠模型病理改變錶現為腎小管及腎間質受損,與急性腎損傷病理改變特徵相符閤.I/R後尿中NGAL水平增高,與尿中NAG及腎小管間質損傷程度成正相關,提示NGAL可能是急性腎損傷時腎小管損傷特異性的生物標誌物.C.sinensis可能通過調節腎組織中HIF-1α和NGAL的錶達而達到腎保護作用.
목적:관찰대서신결혈재관주(I/R)후뇨중성립세포명효매상관지질운재단백(neutrophil gelatinaseassociated lipocalin,NGAL)농도、신조직결양유도인자-1 α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1 α)화NGAL적표체이급동충하초(Cordyceps sinensis,C.sinensis)간예후대기적영향,탐토C.sinensis적신보호작용궤제.방법:건강웅성SD대서45지수궤분위가수술(sham)조、I/R조화C.sinensis조,매조15지.3조조내재안24,48,72h분성3개아조,매조5지.용적제우신후협폐좌신체1h회복재관주적방법건립신I/R모형,sham조적제우신후미협폐좌신체,술후매일여이생리염수(2 mL/d)관위,I/R조화C.sinensis조분별재술후여이생리염수(2 mL/d)화인공C.sinensis분[5.0 g/(kg· d)]관위,재상응시간점처사대서.검측각조대서혈뇨소담(BUN)화혈기항(SCr),비색법검측각조대서적뇨중N-을선-β-D-안기산포도당감매(NAG)함량,ELISA법검측각조대서뇨NGAL농도,HE염색관찰대서신소관간질병리변화,병용신소관간질반정량계분법분석각조대서병리손상정황,RT-PCR검측각조대서신조직중HIF-1αmRNA적표체수평,면역형광공취초법관찰각조대서신조직HIF-1 α화NGAL단백적표체정황.결과:여sham조상비,I/R조화C.sinensis조대서적BUN급SCr수평증고(P＜0.05),뇨중NAG화NGAL증다(P＜0.05).Sham조대서신소구급소관간질균정상,무명현병리개변；I/R조출현신소관상피세포보편종창,가견소관확장,관강관형,쇄상연소실,부분상피세포변성배사등개변,신소구무명현병리개변.여sham조상비,I/R조화C.sinensis조각시간점대서신조직HIF-1 α적mRNA급단백、NGAL단백적표체균명현승고(P＜0.05).여I/R조상비교,C.sinensis조각시간점적BUN화SCr수평하강(p＜0.05),뇨중NAG화NGAL농도강저(P＜0.05),신조직NGAL단백적표체하조(P＜0.05),HIF-1α mRNA급기단백적표체상조(P＜0.05).신소관병리반정량계분현시C.sinensis조교I/R조소관간질손상명현개선.결론:I/R대서모형병리개변표현위신소관급신간질수손,여급성신손상병리개변특정상부합.I/R후뇨중NGAL수평증고,여뇨중NAG급신소관간질손상정도성정상관,제시NGAL가능시급성신손상시신소관손상특이성적생물표지물.C.sinensis가능통과조절신조직중HIF-1α화NGAL적표체이체도신보호작용.
