中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
5期
115-119
,共5页
陈克研%蔡书成%陈振文%王洋%张贺%王承利
陳剋研%蔡書成%陳振文%王洋%張賀%王承利
진극연%채서성%진진문%왕양%장하%왕승리
心肌细胞%分离培养%大鼠
心肌細胞%分離培養%大鼠
심기세포%분리배양%대서
本试验取新生24 h内的Wistar大鼠心肌组织,无菌剪碎后采用胰酶消化法分离细胞,用含20％胎牛血清的DMEM/F12培养基培养,逐日在倒置相差显微镜下观察.结果于培养后48 h即可观察到部分细胞搏动；72 h后,细胞逐渐展开,搏动频率在60～70次/min,从而初步确立培养的细胞为心肌细胞；进一步采用心肌细胞特异性蛋白(cTnT)抗体和α肌动蛋白(α-actin)单克隆抗体分别对培养的心肌细胞进行免疫荧光及免疫组织化学鉴定,结果均呈阳性.
本試驗取新生24 h內的Wistar大鼠心肌組織,無菌剪碎後採用胰酶消化法分離細胞,用含20％胎牛血清的DMEM/F12培養基培養,逐日在倒置相差顯微鏡下觀察.結果于培養後48 h即可觀察到部分細胞搏動；72 h後,細胞逐漸展開,搏動頻率在60～70次/min,從而初步確立培養的細胞為心肌細胞；進一步採用心肌細胞特異性蛋白(cTnT)抗體和α肌動蛋白(α-actin)單剋隆抗體分彆對培養的心肌細胞進行免疫熒光及免疫組織化學鑒定,結果均呈暘性.
본시험취신생24 h내적Wistar대서심기조직,무균전쇄후채용이매소화법분리세포,용함20％태우혈청적DMEM/F12배양기배양,축일재도치상차현미경하관찰.결과우배양후48 h즉가관찰도부분세포박동；72 h후,세포축점전개,박동빈솔재60～70차/min,종이초보학립배양적세포위심기세포；진일보채용심기세포특이성단백(cTnT)항체화α기동단백(α-actin)단극륭항체분별대배양적심기세포진행면역형광급면역조직화학감정,결과균정양성.
