CAJ | 학술논문

采用RT-PCR技术分别扩增了鹅源高产禽流感病毒的6条内部基因片段,近期分离的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素基因以及N3亚型参考毒株的神经氨酸酶基因,分别构建了8个基因的转录与表达载体,利用反向遗传学技术拯救出了全部基因都源于禽源的重组流感病毒疫苗株rH5N3.通过对血凝素蛋白HA1和HA2连接肽处的5个碱性氨基酸(R-R-R-K-K)基因缺失与修饰,从而消除了病毒基因的毒力相关序列,拯救的rH5N3疫苗株对鸡和鸡胚均无致病性,病毒在鸡胚尿囊液和细胞培养上清的HA效价得到极大提高,分别为1∶2048和1∶512.制备的禽流感疫苗免疫动物后4～5周即可诱导产生高效价的HI抗体,鸡免疫后18周依然保持高水平的HI抗体.重组疫苗不论是对于国内早期分离的禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96还是近期分离的A/Goose/HLJ/QFY/04都能够产生完全的免疫保护作用,免疫鸡攻毒后不发病、不排毒、不死亡.带有N3鉴别诊断标记禽流感疫苗株的研制为H5N1高致病性禽流感的防治提供了新的技术保障.
채용RT-PCR기술분별확증료아원고산금류감병독적6조내부기인편단,근기분리적H5N1아형금류감병독적혈응소기인이급N3아형삼고독주적신경안산매기인,분별구건료8개기인적전록여표체재체,이용반향유전학기술증구출료전부기인도원우금원적중조류감병독역묘주rH5N3.통과대혈응소단백HA1화HA2련접태처적5개감성안기산(R-R-R-K-K)기인결실여수식,종이소제료병독기인적독력상관서렬,증구적rH5N3역묘주대계화계배균무치병성,병독재계배뇨낭액화세포배양상청적HA효개득도겁대제고,분별위1∶2048화1∶512.제비적금류감역묘면역동물후4～5주즉가유도산생고효개적HI항체,계면역후18주의연보지고수평적HI항체.중조역묘불론시대우국내조기분리적금류감병독A/Goose/Guangdong/1/96환시근기분리적A/Goose/HLJ/QFY/04도능구산생완전적면역보호작용,면역계공독후불발병、불배독、불사망.대유N3감별진단표기금류감역묘주적연제위H5N1고치병성금류감적방치제공료신적기술보장.