中国兽医科学
中國獸醫科學
중국수의과학
VETERINARY SCIENCE IN CHINA
2008年
5期
401-406
,共6页
王小武%符芳%许红喜%周艳君%童光志%李曦
王小武%符芳%許紅喜%週豔君%童光誌%李晞
왕소무%부방%허홍희%주염군%동광지%리희
猪生殖与呼吸综合征病毒%SYBR Green-Ⅰ%荧光定量PCR
豬生殖與呼吸綜閤徵病毒%SYBR Green-Ⅰ%熒光定量PCR
저생식여호흡종합정병독%SYBR Green-Ⅰ%형광정량PCR
根据猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白基因核酸序列设计引物,经BLAST比较发现,该引物既可以扩增较早发现的PRRSV毒株,也可以扩增近期发现的在Nsp2基因上有较大变异的PRRSV毒株,以含有该引物扩增序列的重组质粒作为标准品建立了检测PRRSV的SYBR Green-Ⅰ荧光定量PCR方法.结果表明,该方法标准曲线的相关系数大于0.99,敏感性可以达到1×101拷贝/μL,约为普通PCR的100倍;用该方法检测人工感染PRRSV的猪全血,结果阳性检出率为100%.敏感性、特异性和稳定性试验表明,该方法具有很高的敏感性、特异性和稳定性,可以用来快速检测PRRSV.
根據豬生殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)GP5蛋白基因覈痠序列設計引物,經BLAST比較髮現,該引物既可以擴增較早髮現的PRRSV毒株,也可以擴增近期髮現的在Nsp2基因上有較大變異的PRRSV毒株,以含有該引物擴增序列的重組質粒作為標準品建立瞭檢測PRRSV的SYBR Green-Ⅰ熒光定量PCR方法.結果錶明,該方法標準麯線的相關繫數大于0.99,敏感性可以達到1×101拷貝/μL,約為普通PCR的100倍;用該方法檢測人工感染PRRSV的豬全血,結果暘性檢齣率為100%.敏感性、特異性和穩定性試驗錶明,該方法具有很高的敏感性、特異性和穩定性,可以用來快速檢測PRRSV.
근거저생식여호흡종합정병독(PRRSV)GP5단백기인핵산서렬설계인물,경BLAST비교발현,해인물기가이확증교조발현적PRRSV독주,야가이확증근기발현적재Nsp2기인상유교대변이적PRRSV독주,이함유해인물확증서렬적중조질립작위표준품건립료검측PRRSV적SYBR Green-Ⅰ형광정량PCR방법.결과표명,해방법표준곡선적상관계수대우0.99,민감성가이체도1×101고패/μL,약위보통PCR적100배;용해방법검측인공감염PRRSV적저전혈,결과양성검출솔위100%.민감성、특이성화은정성시험표명,해방법구유흔고적민감성、특이성화은정성,가이용래쾌속검측PRRSV.
