华中农业大学学报
華中農業大學學報
화중농업대학학보
JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2008年
3期
350-353
,共4页
曾翠平%王晓杜%戴汉川%龙良启%伍晓雄
曾翠平%王曉杜%戴漢川%龍良啟%伍曉雄
증취평%왕효두%대한천%룡량계%오효웅
猪%α-干扰素%原核表达%单克隆抗体
豬%α-榦擾素%原覈錶達%單剋隆抗體
저%α-간우소%원핵표체%단극륭항체
将猪IFN-α(poIFN-α)成熟蛋白基因克隆于pET-28a载体中,转染大肠杆菌,并进行诱导表达.经SDS-PAGE检测,融合表达的蛋白poIFN-α大小约27ku.收获融合表达的poIFN-α,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过间接ELISA方法对融合细胞进行检测,结果获得了1株能稳定分泌抗poIFN-α蛋白抗体的杂交瘤细胞株,命名为2H12株.Western-blotting结果及单克隆抗体亚型鉴定结果表明,单抗与重组蛋白发生特异性反应,单抗为IgG1亚型,且轻链为κ链.
將豬IFN-α(poIFN-α)成熟蛋白基因剋隆于pET-28a載體中,轉染大腸桿菌,併進行誘導錶達.經SDS-PAGE檢測,融閤錶達的蛋白poIFN-α大小約27ku.收穫融閤錶達的poIFN-α,免疫BALB/c小鼠,取脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞進行融閤,通過間接ELISA方法對融閤細胞進行檢測,結果穫得瞭1株能穩定分泌抗poIFN-α蛋白抗體的雜交瘤細胞株,命名為2H12株.Western-blotting結果及單剋隆抗體亞型鑒定結果錶明,單抗與重組蛋白髮生特異性反應,單抗為IgG1亞型,且輕鏈為κ鏈.
장저IFN-α(poIFN-α)성숙단백기인극륭우pET-28a재체중,전염대장간균,병진행유도표체.경SDS-PAGE검측,융합표체적단백poIFN-α대소약27ku.수획융합표체적poIFN-α,면역BALB/c소서,취비세포여SP2/0골수류세포진행융합,통과간접ELISA방법대융합세포진행검측,결과획득료1주능은정분비항poIFN-α단백항체적잡교류세포주,명명위2H12주.Western-blotting결과급단극륭항체아형감정결과표명,단항여중조단백발생특이성반응,단항위IgG1아형,차경련위κ련.
