CAJ | 학술논문

[目的]研究石鲽基因组DNA的提取及其RAPD体系的建立和优化.[方法]以石鲽为试材,按常规酚/氯仿抽提法提取其基因组的DNA,对影响RAPD反应的各因素进行优化,建立了石鲽的最佳RAPD反应体系和程序.[结果]采用常规酚/氯仿抽提法获得的DNA完全能够满足RAPD分析的要求.通过优化建立一套适合石鲽的稳定的RAPD反应体系:反应体系总体积为25 μl,包括10×buffer 2.5 μl,MgCl 2 2 mmol/L,dNTPs 0.15 mmol/L,引物 0.2 μmol/L,模板 30 ng,Taq 酶 1 U.扩增程序为:94 ℃预变性5 min,45次PCR循环(94 ℃变性45 s,36 ℃退火45 s,72 ℃延伸2 min 和72 ℃延伸10 min.利用该体系对OPK和OPV系列共40条引物进行扩增,发现其中部分引物能产生稳定、清晰的条带.[结论]该体系为石鲽遗传多样性以及相关分子标记的研究奠定了基础.
[목적]연구석접기인조DNA적제취급기RAPD체계적건립화우화.[방법]이석접위시재,안상규분/록방추제법제취기기인조적DNA,대영향RAPD반응적각인소진행우화,건립료석접적최가RAPD반응체계화정서.[결과]채용상규분/록방추제법획득적DNA완전능구만족RAPD분석적요구.통과우화건립일투괄합석접적은정적RAPD반응체계:반응체계총체적위25 μl,포괄10×buffer 2.5 μl,MgCl 2 2 mmol/L,dNTPs 0.15 mmol/L,인물 0.2 μmol/L,모판 30 ng,Taq 매 1 U.확증정서위:94 ℃예변성5 min,45차PCR순배(94 ℃변성45 s,36 ℃퇴화45 s,72 ℃연신2 min 화72 ℃연신10 min.이용해체계대OPK화OPV계렬공40조인물진행확증,발현기중부분인물능산생은정、청석적조대.[결론]해체계위석접유전다양성이급상관분자표기적연구전정료기출.