微生物与感染
微生物與感染
미생물여감염
JOURNAL OF MICROBES AND INFECTION
2009年
1期
13-15,25
,共4页
陆萍%凌冰%方风琴%季育华
陸萍%凌冰%方風琴%季育華
륙평%릉빙%방풍금%계육화
巨细胞病毒%去白细胞滤器%成纤维细胞
巨細胞病毒%去白細胞濾器%成纖維細胞
거세포병독%거백세포려기%성섬유세포
为了评估目前常用的去白细胞滤器去除血液成分中人巨细胞病毒(HCMV)的效果,我们在献血员中筛选获得HCMV-IgG、pp65皆阴性的血液,分离外周血单个核细胞(PBMC),将HCMV感染的人成纤维细胞与PBMC共培养,感染HCMV的PBMC经抗人成纤维抗体和抗CD45磁珠2次分选纯化后,将CD45+单核细胞加回原全血中,建立HCMV潜伏感染的模型,再用去白细胞滤器过滤.用实时聚合酶链反应(PCR)定量测定过滤前、后血液样本中的病毒载量,残留成纤维细胞所含的HCMV通过定量反转录PCR(RT-PCR)扩增脯-4-羟化酶exon12a mRNA来校正.结果显示,使用去白细胞滤器后,每单位(200 ml)全血血液中,白细胞的去除率为99.98%.全血中平均HCMV病毒载量从3 742拷贝/μl降至22.57拷贝/μl,降低2.50 log10 ,说明去白细胞滤器虽然可明显减少全血中HCMV病毒的载量,但并不能完全去除病毒.
為瞭評估目前常用的去白細胞濾器去除血液成分中人巨細胞病毒(HCMV)的效果,我們在獻血員中篩選穫得HCMV-IgG、pp65皆陰性的血液,分離外週血單箇覈細胞(PBMC),將HCMV感染的人成纖維細胞與PBMC共培養,感染HCMV的PBMC經抗人成纖維抗體和抗CD45磁珠2次分選純化後,將CD45+單覈細胞加迴原全血中,建立HCMV潛伏感染的模型,再用去白細胞濾器過濾.用實時聚閤酶鏈反應(PCR)定量測定過濾前、後血液樣本中的病毒載量,殘留成纖維細胞所含的HCMV通過定量反轉錄PCR(RT-PCR)擴增脯-4-羥化酶exon12a mRNA來校正.結果顯示,使用去白細胞濾器後,每單位(200 ml)全血血液中,白細胞的去除率為99.98%.全血中平均HCMV病毒載量從3 742拷貝/μl降至22.57拷貝/μl,降低2.50 log10 ,說明去白細胞濾器雖然可明顯減少全血中HCMV病毒的載量,但併不能完全去除病毒.
위료평고목전상용적거백세포려기거제혈액성분중인거세포병독(HCMV)적효과,아문재헌혈원중사선획득HCMV-IgG、pp65개음성적혈액,분리외주혈단개핵세포(PBMC),장HCMV감염적인성섬유세포여PBMC공배양,감염HCMV적PBMC경항인성섬유항체화항CD45자주2차분선순화후,장CD45+단핵세포가회원전혈중,건립HCMV잠복감염적모형,재용거백세포려기과려.용실시취합매련반응(PCR)정량측정과려전、후혈액양본중적병독재량,잔류성섬유세포소함적HCMV통과정량반전록PCR(RT-PCR)확증포-4-간화매exon12a mRNA래교정.결과현시,사용거백세포려기후,매단위(200 ml)전혈혈액중,백세포적거제솔위99.98%.전혈중평균HCMV병독재량종3 742고패/μl강지22.57고패/μl,강저2.50 log10 ,설명거백세포려기수연가명현감소전혈중HCMV병독적재량,단병불능완전거제병독.
