细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2009年
6期
516-518
,共3页
朱晓美%李淑珍%吴春铃%包红霞%朱大岭%唐晓波
硃曉美%李淑珍%吳春鈴%包紅霞%硃大嶺%唐曉波
주효미%리숙진%오춘령%포홍하%주대령%당효파
CES1%重组蛋白%多克隆抗体
CES1%重組蛋白%多剋隆抗體
CES1%중조단백%다극륭항체
目的: 制备兔抗人羧酸酯酶1(CES1)多克隆抗体(pAb), 并对抗体进行特性鉴定.方法: 以人正常肝cDNA文库为模板, 构建重组表达质粒pGEX-4T-1-CES1(即CES1-GST)和pET-32a-CES1(即CES1-His).CES1-GST融合蛋白作为免疫原制备兔pAb, 辛酸-硫酸铵法纯化抗体, 采用Western blot和免疫组化鉴定抗体的特异性.结果: CES1-GST和CES1-His融合蛋白均在大肠杆菌中以包涵体形式大量表达.兔抗人CES1 pAb效价为1∶ 64 000.Western blot鉴定表明, 该抗体可识别重组人CES1蛋白, 也可特异地识别人肝微粒体中的CES1亚基.免疫组织化学鉴定显示该抗体可特异性识别正常肝组织中的CES1蛋白.结论: 成功地制备了兔抗人CES1 pAb, 该抗体可应用于ELISA、 Western blot、免疫组化等实验, 为进一步研究CES1的功能提供了特异性检测工具.
目的: 製備兔抗人羧痠酯酶1(CES1)多剋隆抗體(pAb), 併對抗體進行特性鑒定.方法: 以人正常肝cDNA文庫為模闆, 構建重組錶達質粒pGEX-4T-1-CES1(即CES1-GST)和pET-32a-CES1(即CES1-His).CES1-GST融閤蛋白作為免疫原製備兔pAb, 辛痠-硫痠銨法純化抗體, 採用Western blot和免疫組化鑒定抗體的特異性.結果: CES1-GST和CES1-His融閤蛋白均在大腸桿菌中以包涵體形式大量錶達.兔抗人CES1 pAb效價為1∶ 64 000.Western blot鑒定錶明, 該抗體可識彆重組人CES1蛋白, 也可特異地識彆人肝微粒體中的CES1亞基.免疫組織化學鑒定顯示該抗體可特異性識彆正常肝組織中的CES1蛋白.結論: 成功地製備瞭兔抗人CES1 pAb, 該抗體可應用于ELISA、 Western blot、免疫組化等實驗, 為進一步研究CES1的功能提供瞭特異性檢測工具.
목적: 제비토항인최산지매1(CES1)다극륭항체(pAb), 병대항체진행특성감정.방법: 이인정상간cDNA문고위모판, 구건중조표체질립pGEX-4T-1-CES1(즉CES1-GST)화pET-32a-CES1(즉CES1-His).CES1-GST융합단백작위면역원제비토pAb, 신산-류산안법순화항체, 채용Western blot화면역조화감정항체적특이성.결과: CES1-GST화CES1-His융합단백균재대장간균중이포함체형식대량표체.토항인CES1 pAb효개위1∶ 64 000.Western blot감정표명, 해항체가식별중조인CES1단백, 야가특이지식별인간미립체중적CES1아기.면역조직화학감정현시해항체가특이성식별정상간조직중적CES1단백.결론: 성공지제비료토항인CES1 pAb, 해항체가응용우ELISA、 Western blot、면역조화등실험, 위진일보연구CES1적공능제공료특이성검측공구.
