医学研究生学报
醫學研究生學報
의학연구생학보
JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATE
2009年
12期
1243-1247,后插2
,共6页
程忠良%秦瑾%刘正湘%林敬阳%刘毓%左后娟%汪道文
程忠良%秦瑾%劉正湘%林敬暘%劉毓%左後娟%汪道文
정충량%진근%류정상%림경양%류육%좌후연%왕도문
ICAP1α%T38A%I138A%整合素β1
ICAP1α%T38A%I138A%整閤素β1
ICAP1α%T38A%I138A%정합소β1
目的:整合素β1-ICAP1α复合体在细胞黏附等过程中介导双向跨膜信号转导,并与囊泡特异性标记物共定位.文中构建并鉴定ICAP1α基因及其突变体T38A、I138A真核表达载体. 方法:以pCMV-SPORT6/ICAP1α质粒为模板,PCR扩增ICAP1α基因片段,双酶切后与AAV载体重组连接.同时采用重叠PCR定点突变法构建其突变体pAAV-T38A、pAAV-I138A表达载体.重组质粒经酶切鉴定和DNA 序列测定, 筛选出重组pAAV-ICAP1α、pAAV-T38A和pAAV-I138A真核表达载体. 结果:阳性重组质粒酶切后测序比对鉴定,与预期序列完全相符.结论:成功构建pAAV-ICAP1α、pAAV-T38A和pAAV-I138A真核表达载体,可为ICAP1α基因及其突变体T38A、I138A的生物学功能研究提供基因材料.
目的:整閤素β1-ICAP1α複閤體在細胞黏附等過程中介導雙嚮跨膜信號轉導,併與囊泡特異性標記物共定位.文中構建併鑒定ICAP1α基因及其突變體T38A、I138A真覈錶達載體. 方法:以pCMV-SPORT6/ICAP1α質粒為模闆,PCR擴增ICAP1α基因片段,雙酶切後與AAV載體重組連接.同時採用重疊PCR定點突變法構建其突變體pAAV-T38A、pAAV-I138A錶達載體.重組質粒經酶切鑒定和DNA 序列測定, 篩選齣重組pAAV-ICAP1α、pAAV-T38A和pAAV-I138A真覈錶達載體. 結果:暘性重組質粒酶切後測序比對鑒定,與預期序列完全相符.結論:成功構建pAAV-ICAP1α、pAAV-T38A和pAAV-I138A真覈錶達載體,可為ICAP1α基因及其突變體T38A、I138A的生物學功能研究提供基因材料.
목적:정합소β1-ICAP1α복합체재세포점부등과정중개도쌍향과막신호전도,병여낭포특이성표기물공정위.문중구건병감정ICAP1α기인급기돌변체T38A、I138A진핵표체재체. 방법:이pCMV-SPORT6/ICAP1α질립위모판,PCR확증ICAP1α기인편단,쌍매절후여AAV재체중조련접.동시채용중첩PCR정점돌변법구건기돌변체pAAV-T38A、pAAV-I138A표체재체.중조질립경매절감정화DNA 서렬측정, 사선출중조pAAV-ICAP1α、pAAV-T38A화pAAV-I138A진핵표체재체. 결과:양성중조질립매절후측서비대감정,여예기서렬완전상부.결론:성공구건pAAV-ICAP1α、pAAV-T38A화pAAV-I138A진핵표체재체,가위ICAP1α기인급기돌변체T38A、I138A적생물학공능연구제공기인재료.
