生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2010年
4期
484-487
,共4页
林宇翔%于芳%绳纪坡%高宁%马祖兴%胡宝成
林宇翔%于芳%繩紀坡%高寧%馬祖興%鬍寶成
림우상%우방%승기파%고저%마조흥%호보성
脆性组氨酸三联体基因%小干扰RNA%表达载体
脆性組氨痠三聯體基因%小榦擾RNA%錶達載體
취성조안산삼련체기인%소간우RNA%표체재체
目的:构建脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的小干扰RNA(siRNA),并检测其对293T细胞内源性FHIT基因表达的干扰效果.方法:根据FHIT基因序列,通过生物信息学网站预测可能的siRNA,从中筛选出2条合理的FHIT-siRNA,将其克隆到siRNA表达载体pSileneer 2.1-U6 Hygro中,转化大肠杆菌DH5α,挑取阳性克隆进行测序鉴定;将构建成功的FHIT-siRNA重组载体转染人胚肾细胞293T,Western印迹检测siRNA对293T内源性FHit表达的干扰效果.结果:构建了2个FHIT-siRNA重组质粒,2条siRNA都有干扰作用,其中一条的作用效果可达50%以上.结论:构建的FHIT-siRNA为进一步研究FHIT的功能提供了有利的工具.
目的:構建脆性組氨痠三聯體(FHIT)基因的小榦擾RNA(siRNA),併檢測其對293T細胞內源性FHIT基因錶達的榦擾效果.方法:根據FHIT基因序列,通過生物信息學網站預測可能的siRNA,從中篩選齣2條閤理的FHIT-siRNA,將其剋隆到siRNA錶達載體pSileneer 2.1-U6 Hygro中,轉化大腸桿菌DH5α,挑取暘性剋隆進行測序鑒定;將構建成功的FHIT-siRNA重組載體轉染人胚腎細胞293T,Western印跡檢測siRNA對293T內源性FHit錶達的榦擾效果.結果:構建瞭2箇FHIT-siRNA重組質粒,2條siRNA都有榦擾作用,其中一條的作用效果可達50%以上.結論:構建的FHIT-siRNA為進一步研究FHIT的功能提供瞭有利的工具.
목적:구건취성조안산삼련체(FHIT)기인적소간우RNA(siRNA),병검측기대293T세포내원성FHIT기인표체적간우효과.방법:근거FHIT기인서렬,통과생물신식학망참예측가능적siRNA,종중사선출2조합리적FHIT-siRNA,장기극륭도siRNA표체재체pSileneer 2.1-U6 Hygro중,전화대장간균DH5α,도취양성극륭진행측서감정;장구건성공적FHIT-siRNA중조재체전염인배신세포293T,Western인적검측siRNA대293T내원성FHit표체적간우효과.결과:구건료2개FHIT-siRNA중조질립,2조siRNA도유간우작용,기중일조적작용효과가체50%이상.결론:구건적FHIT-siRNA위진일보연구FHIT적공능제공료유리적공구.
