南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2011年
1期
5-10
,共6页
人羊膜间充质细胞%干细胞特性%胰岛样细胞%诱导分化
人羊膜間充質細胞%榦細胞特性%胰島樣細胞%誘導分化
인양막간충질세포%간세포특성%이도양세포%유도분화
目的 分离培养人羊膜间质细胞(hAMCs),初步探讨其向胰岛样细胞的诱导分化.方法 羊膜组织经胰蛋白酶消化去除上皮细胞后,采用胶原酶I联合中性蛋白酶的方法分离hAMCs.细胞免疫荧光检测分离得到细胞表面标记Vimentin+,SSEA-4+表达;流式细胞仪检测CD29,CD90及CD34,CD45表达;RT-PCR检测ACTG2、ACTA2、MMP2、Cripto、Sox2、LEFTYA、nanog、Oct-4基因表达;添加诱导因子诱导hAMCs向胰岛样细胞分化.结果 分离得到的hAMCs可体外长期传代,并保持稳定的遗传学特性;细胞表现vimentin+、SSEA-4+;CD29、CD90表达量分别为91.5%±9.93%和48.7%±9.47%;不表达CD34,CD45;表达ACTG2、ACTA2、MMP2和Cripto、Sox2、LEFTYA、nanog、Oct-4等基因.诱导后的细胞表达insulin、PDX1、ngn3、glucagon等基因,并表现insulin+.结论 建立了人羊膜间充质细胞的分离培养方法;在体外可诱导分化为胰岛样细胞.
目的 分離培養人羊膜間質細胞(hAMCs),初步探討其嚮胰島樣細胞的誘導分化.方法 羊膜組織經胰蛋白酶消化去除上皮細胞後,採用膠原酶I聯閤中性蛋白酶的方法分離hAMCs.細胞免疫熒光檢測分離得到細胞錶麵標記Vimentin+,SSEA-4+錶達;流式細胞儀檢測CD29,CD90及CD34,CD45錶達;RT-PCR檢測ACTG2、ACTA2、MMP2、Cripto、Sox2、LEFTYA、nanog、Oct-4基因錶達;添加誘導因子誘導hAMCs嚮胰島樣細胞分化.結果 分離得到的hAMCs可體外長期傳代,併保持穩定的遺傳學特性;細胞錶現vimentin+、SSEA-4+;CD29、CD90錶達量分彆為91.5%±9.93%和48.7%±9.47%;不錶達CD34,CD45;錶達ACTG2、ACTA2、MMP2和Cripto、Sox2、LEFTYA、nanog、Oct-4等基因.誘導後的細胞錶達insulin、PDX1、ngn3、glucagon等基因,併錶現insulin+.結論 建立瞭人羊膜間充質細胞的分離培養方法;在體外可誘導分化為胰島樣細胞.
목적 분리배양인양막간질세포(hAMCs),초보탐토기향이도양세포적유도분화.방법 양막조직경이단백매소화거제상피세포후,채용효원매I연합중성단백매적방법분리hAMCs.세포면역형광검측분리득도세포표면표기Vimentin+,SSEA-4+표체;류식세포의검측CD29,CD90급CD34,CD45표체;RT-PCR검측ACTG2、ACTA2、MMP2、Cripto、Sox2、LEFTYA、nanog、Oct-4기인표체;첨가유도인자유도hAMCs향이도양세포분화.결과 분리득도적hAMCs가체외장기전대,병보지은정적유전학특성;세포표현vimentin+、SSEA-4+;CD29、CD90표체량분별위91.5%±9.93%화48.7%±9.47%;불표체CD34,CD45;표체ACTG2、ACTA2、MMP2화Cripto、Sox2、LEFTYA、nanog、Oct-4등기인.유도후적세포표체insulin、PDX1、ngn3、glucagon등기인,병표현insulin+.결론 건립료인양막간충질세포적분리배양방법;재체외가유도분화위이도양세포.
