复旦学报(医学版)
複旦學報(醫學版)
복단학보(의학판)
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2011年
2期
126-130,135
,共6页
倪颖勤%姜春晖%徐格致%时乐%笪翠娣
倪穎勤%薑春暉%徐格緻%時樂%笪翠娣
예영근%강춘휘%서격치%시악%달취제
视网膜%光损伤%凋亡%光感受器%小胶质细胞%IL-1β%大鼠
視網膜%光損傷%凋亡%光感受器%小膠質細胞%IL-1β%大鼠
시망막%광손상%조망%광감수기%소효질세포%IL-1β%대서
目的 探讨大鼠视网膜光损伤模型中小胶质细胞的迁移、活化及其与光感受器凋亡的关系.方法 将SD大鼠分为光照组(n=78)和正常对照组(n=15),光照组大鼠在自制的光损伤箱中接受强度为2500 lux的宽谱蓝光照射24 h,建立光损伤模型.在光照结束后2 h、6 h、1天、3天、7天和14天时(每一时间点,n=13),用原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)染色观察两组大鼠视网膜细胞凋亡情况;用免疫荧光染色观察视网膜OX42( + )小胶质细胞的形态改变和迁移活动,并对视网膜外层的TUNEL( + )细胞和OX42( + )细胞分别计数并绘制时间-数量曲线;用透射电镜观察进入光感受器层的小胶质细胞的吞噬行为;用real-time PCR法定量分析光照后视网膜胶质源性神经毒性物质IL-1β mRNA的表达变化.结果 光照结束后2 h视网膜外核层(out nuclear layer,ONL)即可见TUNEL( + )细胞,1天后达高峰,3天后逐渐减少;光照结束后6 h视网膜ONL开始出现少量OX42( + )细胞,逐渐增多并于3天后达高峰,7天后渐消失,其形态转变为肥大细胞体的激活型.从时间-数量曲线可见OX42( + )细胞的迁移高峰落后并紧随凋亡高峰;强光照射上调了视网膜IL-1β mRNA的表达,其随时间变化的趋势同小胶质细胞的激活和迁移趋势基本一致;透射电镜显示进入ONL的小胶质细胞吞噬了光感受器的外节膜盘.结论 视网膜光损伤模型中光感受器的凋亡诱导小胶质细胞向ONL的迁移、活化及吞噬行为,并伴有视网膜IL-1β表达水平的升高,小胶质细胞的活化可能在加速光感受器变性过程中起重要作用.
目的 探討大鼠視網膜光損傷模型中小膠質細胞的遷移、活化及其與光感受器凋亡的關繫.方法 將SD大鼠分為光照組(n=78)和正常對照組(n=15),光照組大鼠在自製的光損傷箱中接受彊度為2500 lux的寬譜藍光照射24 h,建立光損傷模型.在光照結束後2 h、6 h、1天、3天、7天和14天時(每一時間點,n=13),用原位末耑標記法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)染色觀察兩組大鼠視網膜細胞凋亡情況;用免疫熒光染色觀察視網膜OX42( + )小膠質細胞的形態改變和遷移活動,併對視網膜外層的TUNEL( + )細胞和OX42( + )細胞分彆計數併繪製時間-數量麯線;用透射電鏡觀察進入光感受器層的小膠質細胞的吞噬行為;用real-time PCR法定量分析光照後視網膜膠質源性神經毒性物質IL-1β mRNA的錶達變化.結果 光照結束後2 h視網膜外覈層(out nuclear layer,ONL)即可見TUNEL( + )細胞,1天後達高峰,3天後逐漸減少;光照結束後6 h視網膜ONL開始齣現少量OX42( + )細胞,逐漸增多併于3天後達高峰,7天後漸消失,其形態轉變為肥大細胞體的激活型.從時間-數量麯線可見OX42( + )細胞的遷移高峰落後併緊隨凋亡高峰;彊光照射上調瞭視網膜IL-1β mRNA的錶達,其隨時間變化的趨勢同小膠質細胞的激活和遷移趨勢基本一緻;透射電鏡顯示進入ONL的小膠質細胞吞噬瞭光感受器的外節膜盤.結論 視網膜光損傷模型中光感受器的凋亡誘導小膠質細胞嚮ONL的遷移、活化及吞噬行為,併伴有視網膜IL-1β錶達水平的升高,小膠質細胞的活化可能在加速光感受器變性過程中起重要作用.
목적 탐토대서시망막광손상모형중소효질세포적천이、활화급기여광감수기조망적관계.방법 장SD대서분위광조조(n=78)화정상대조조(n=15),광조조대서재자제적광손상상중접수강도위2500 lux적관보람광조사24 h,건립광손상모형.재광조결속후2 h、6 h、1천、3천、7천화14천시(매일시간점,n=13),용원위말단표기법(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)염색관찰량조대서시망막세포조망정황;용면역형광염색관찰시망막OX42( + )소효질세포적형태개변화천이활동,병대시망막외층적TUNEL( + )세포화OX42( + )세포분별계수병회제시간-수량곡선;용투사전경관찰진입광감수기층적소효질세포적탄서행위;용real-time PCR법정량분석광조후시망막효질원성신경독성물질IL-1β mRNA적표체변화.결과 광조결속후2 h시망막외핵층(out nuclear layer,ONL)즉가견TUNEL( + )세포,1천후체고봉,3천후축점감소;광조결속후6 h시망막ONL개시출현소량OX42( + )세포,축점증다병우3천후체고봉,7천후점소실,기형태전변위비대세포체적격활형.종시간-수량곡선가견OX42( + )세포적천이고봉락후병긴수조망고봉;강광조사상조료시망막IL-1β mRNA적표체,기수시간변화적추세동소효질세포적격활화천이추세기본일치;투사전경현시진입ONL적소효질세포탄서료광감수기적외절막반.결론 시망막광손상모형중광감수기적조망유도소효질세포향ONL적천이、활화급탄서행위,병반유시망막IL-1β표체수평적승고,소효질세포적활화가능재가속광감수기변성과정중기중요작용.