生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2011年
6期
806-808,891
,共4页
高婷%赵怀龙%刘萱%曹诚
高婷%趙懷龍%劉萱%曹誠
고정%조부룡%류훤%조성
甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶%原核表达%包涵体%复性%自激活
甘露聚糖結閤凝集素相關絲氨痠蛋白酶%原覈錶達%包涵體%複性%自激活
감로취당결합응집소상관사안산단백매%원핵표체%포함체%복성%자격활
目的:获得酶原形式的重组人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2 (MASP2).方法:在大肠杆菌中诱导表达重组人MASP2全长蛋白,包涵体裂解后,经复性、透析、浓缩、考马斯亮蓝染色、SDS-PAGE及Western印迹,鉴定纯化结果及酶活性.结果:复性后的MASP2蛋白经考马斯亮蓝染色未见杂带.自激活实验表明,当MASP2浓度在1 μmool/L以下时,无论在4℃还是37℃,都能较稳定地保持酶原形式；蛋白浓度为3.5μmool/L时只能在4℃保持稳定,37℃发生自激活；蛋白浓度达到12 μmool/L后,在4℃时已不能稳定存在.结论:获得了较纯的重组人MASP2蛋白,且具有自激活活性.
目的:穫得酶原形式的重組人甘露聚糖結閤凝集素相關絲氨痠蛋白酶2 (MASP2).方法:在大腸桿菌中誘導錶達重組人MASP2全長蛋白,包涵體裂解後,經複性、透析、濃縮、攷馬斯亮藍染色、SDS-PAGE及Western印跡,鑒定純化結果及酶活性.結果:複性後的MASP2蛋白經攷馬斯亮藍染色未見雜帶.自激活實驗錶明,噹MASP2濃度在1 μmool/L以下時,無論在4℃還是37℃,都能較穩定地保持酶原形式；蛋白濃度為3.5μmool/L時隻能在4℃保持穩定,37℃髮生自激活；蛋白濃度達到12 μmool/L後,在4℃時已不能穩定存在.結論:穫得瞭較純的重組人MASP2蛋白,且具有自激活活性.
목적:획득매원형식적중조인감로취당결합응집소상관사안산단백매2 (MASP2).방법:재대장간균중유도표체중조인MASP2전장단백,포함체렬해후,경복성、투석、농축、고마사량람염색、SDS-PAGE급Western인적,감정순화결과급매활성.결과:복성후적MASP2단백경고마사량람염색미견잡대.자격활실험표명,당MASP2농도재1 μmool/L이하시,무론재4℃환시37℃,도능교은정지보지매원형식；단백농도위3.5μmool/L시지능재4℃보지은정,37℃발생자격활；단백농도체도12 μmool/L후,재4℃시이불능은정존재.결론:획득료교순적중조인MASP2단백,차구유자격활활성.
