厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2011年
6期
1059-1064
,共6页
钱凌芝%赵永浩%谢勇壮%郑秋阳%张弦%许华曦%张云武
錢凌芝%趙永浩%謝勇壯%鄭鞦暘%張絃%許華晞%張雲武
전릉지%조영호%사용장%정추양%장현%허화희%장운무
TMEM59L%caspases%细胞色素c%线粒体%细胞凋亡
TMEM59L%caspases%細胞色素c%線粒體%細胞凋亡
TMEM59L%caspases%세포색소c%선립체%세포조망
TMEM59L为近年来新发现的脑特异性高表达蛋白,具有促凋亡效果,但其具体的凋亡机制还不清楚.构建了TMEM59L重组质粒,并在HEK293T细胞中过表达TMEM59L,用Annexin V-FITC/PI双染法确定了TMEM59L可以诱导细胞凋亡,之后用免疫印迹方法检测细胞内凋亡相关分子激活情况.结果显示,外源TMEM59L可以降低Bcl-2的蛋白表达水平,诱导细胞色素c从线粒体释放进入细胞质,并且激活caspase-9、caspase-7和caspase-3,但不激活caspase-8；活化的caspase-7和caspase-3进一步酶解死亡底物PARP,导致细胞凋亡；此外,用广谱caspase抑制剂Z-Val-Ala-Asp-FMK(Z-VAD-FMK)抑制caspase-7和caspase-3活性后,死亡底物PARP的酶解也基本被抑制.由此可见,TMEM59L是通过caspase依赖的线粒体途径诱导HEK293T细胞凋亡.
TMEM59L為近年來新髮現的腦特異性高錶達蛋白,具有促凋亡效果,但其具體的凋亡機製還不清楚.構建瞭TMEM59L重組質粒,併在HEK293T細胞中過錶達TMEM59L,用Annexin V-FITC/PI雙染法確定瞭TMEM59L可以誘導細胞凋亡,之後用免疫印跡方法檢測細胞內凋亡相關分子激活情況.結果顯示,外源TMEM59L可以降低Bcl-2的蛋白錶達水平,誘導細胞色素c從線粒體釋放進入細胞質,併且激活caspase-9、caspase-7和caspase-3,但不激活caspase-8；活化的caspase-7和caspase-3進一步酶解死亡底物PARP,導緻細胞凋亡；此外,用廣譜caspase抑製劑Z-Val-Ala-Asp-FMK(Z-VAD-FMK)抑製caspase-7和caspase-3活性後,死亡底物PARP的酶解也基本被抑製.由此可見,TMEM59L是通過caspase依賴的線粒體途徑誘導HEK293T細胞凋亡.
TMEM59L위근년래신발현적뇌특이성고표체단백,구유촉조망효과,단기구체적조망궤제환불청초.구건료TMEM59L중조질립,병재HEK293T세포중과표체TMEM59L,용Annexin V-FITC/PI쌍염법학정료TMEM59L가이유도세포조망,지후용면역인적방법검측세포내조망상관분자격활정황.결과현시,외원TMEM59L가이강저Bcl-2적단백표체수평,유도세포색소c종선립체석방진입세포질,병차격활caspase-9、caspase-7화caspase-3,단불격활caspase-8；활화적caspase-7화caspase-3진일보매해사망저물PARP,도치세포조망；차외,용엄보caspase억제제Z-Val-Ala-Asp-FMK(Z-VAD-FMK)억제caspase-7화caspase-3활성후,사망저물PARP적매해야기본피억제.유차가견,TMEM59L시통과caspase의뢰적선립체도경유도HEK293T세포조망.
