中华传染病杂志
中華傳染病雜誌
중화전염병잡지
CHINESE JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES
2003年
3期
229-232
,共4页
龙健儿%黄莉娜%秦智强%王文逸%陈敏婕%瞿涤
龍健兒%黃莉娜%秦智彊%王文逸%陳敏婕%瞿滌
룡건인%황리나%진지강%왕문일%진민첩%구조
鸭IFN-γ%竞争性RT-PCR%鸭乙型肝炎病毒%DNA免疫
鴨IFN-γ%競爭性RT-PCR%鴨乙型肝炎病毒%DNA免疫
압IFN-γ%경쟁성RT-PCR%압을형간염병독%DNA면역
目的研究鸭IFN-γ(DuIFN-γ)在感染及控制病毒过程中的作用和机制.方法基于β-actm的高度保守序列设计引物,通过RT-PCR方法获得了β-actin的部分cDNA为看家基因,然后构建DuIFN-γ靶片段的竞争性内参照,建立检测DuIFN-γ基因转录的半定量竞争性RT-PCR方法.结果建立了检测DuIFN-γ基因转录的半定量竞争性RT-PCR方法,并检测了在PHA刺激下鸭外周血单核细胞IFN-γ mRNA动态变化,结果表明PHA刺激24～36 h,DuIFN-γmRNA转录量最高.以此方法对用DHBVpreS DNA或与IFN-γ DNA共免疫DHBV感染鸭进行了测定,结果表明IFN-γ表达质粒作为DNA免疫佐剂,可以增强宿主IFN-γ的应答.结论IFN-γ表达质粒为DNA疫苗的有效佐剂.DuIFN-γ基因转录的半定量竞争性RT-PCR方法为研究鸭IFN-γ在DHBV感染及清除中的作用和机制奠定了基础.
目的研究鴨IFN-γ(DuIFN-γ)在感染及控製病毒過程中的作用和機製.方法基于β-actm的高度保守序列設計引物,通過RT-PCR方法穫得瞭β-actin的部分cDNA為看傢基因,然後構建DuIFN-γ靶片段的競爭性內參照,建立檢測DuIFN-γ基因轉錄的半定量競爭性RT-PCR方法.結果建立瞭檢測DuIFN-γ基因轉錄的半定量競爭性RT-PCR方法,併檢測瞭在PHA刺激下鴨外週血單覈細胞IFN-γ mRNA動態變化,結果錶明PHA刺激24～36 h,DuIFN-γmRNA轉錄量最高.以此方法對用DHBVpreS DNA或與IFN-γ DNA共免疫DHBV感染鴨進行瞭測定,結果錶明IFN-γ錶達質粒作為DNA免疫佐劑,可以增彊宿主IFN-γ的應答.結論IFN-γ錶達質粒為DNA疫苗的有效佐劑.DuIFN-γ基因轉錄的半定量競爭性RT-PCR方法為研究鴨IFN-γ在DHBV感染及清除中的作用和機製奠定瞭基礎.
목적연구압IFN-γ(DuIFN-γ)재감염급공제병독과정중적작용화궤제.방법기우β-actm적고도보수서렬설계인물,통과RT-PCR방법획득료β-actin적부분cDNA위간가기인,연후구건DuIFN-γ파편단적경쟁성내삼조,건립검측DuIFN-γ기인전록적반정량경쟁성RT-PCR방법.결과건립료검측DuIFN-γ기인전록적반정량경쟁성RT-PCR방법,병검측료재PHA자격하압외주혈단핵세포IFN-γ mRNA동태변화,결과표명PHA자격24～36 h,DuIFN-γmRNA전록량최고.이차방법대용DHBVpreS DNA혹여IFN-γ DNA공면역DHBV감염압진행료측정,결과표명IFN-γ표체질립작위DNA면역좌제,가이증강숙주IFN-γ적응답.결론IFN-γ표체질립위DNA역묘적유효좌제.DuIFN-γ기인전록적반정량경쟁성RT-PCR방법위연구압IFN-γ재DHBV감염급청제중적작용화궤제전정료기출.
