实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2006年
24期
1709-1710,1719
,共3页
巨容%杜江%兰和魁%王斌%封志纯
巨容%杜江%蘭和魁%王斌%封誌純
거용%두강%란화괴%왕빈%봉지순
胚胎%分化%神经干细胞%人%脑
胚胎%分化%神經榦細胞%人%腦
배태%분화%신경간세포%인%뇌
目的 研究人胚胎神经干细胞体外长期培养的条件、不同部位脑组织神经干细胞数量及其分化能力和特点.方法 分离人胚胎海马、皮质、室周、纹状体脑组织,培养在含碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)、表皮生长因子(EGF)、B27、N2添加剂的无血清培养基中,形成神经球,用有限稀释法进行克隆、传代.计算神经球数量,用溴脱氧尿苷(BrdU)标记神经球,使用免疫细胞化学法鉴定神经干细胞自主分化能力.结果 人胚胎海马、皮质、室周、纹状体部位脑组织均能培养出具有自我增殖能力的神经干细胞,其中海马所含神经干细胞最丰富,室周次之.BrdU检测有正在分裂、增殖的细胞.液氮冻存6个月的细胞复苏后仍具增殖分化能力.细胞贴壁分化后可形成Nestin、胶质原性纤维酸性蛋白(GFAP)、微管相关蛋白2(MAP2)表达阳性细胞.结论 胚胎脑组织具有丰富的神经干细胞,具有自我更新和增殖能力,可长期培养.含b-FGF、EGF的无血清培养基能促进神经干细胞连续稳定增殖,保持神经干细胞特性.分离培养的神经干细胞可向神经元、胶质细胞分化.
目的 研究人胚胎神經榦細胞體外長期培養的條件、不同部位腦組織神經榦細胞數量及其分化能力和特點.方法 分離人胚胎海馬、皮質、室週、紋狀體腦組織,培養在含堿性成纖維細胞生長因子(b-FGF)、錶皮生長因子(EGF)、B27、N2添加劑的無血清培養基中,形成神經毬,用有限稀釋法進行剋隆、傳代.計算神經毬數量,用溴脫氧尿苷(BrdU)標記神經毬,使用免疫細胞化學法鑒定神經榦細胞自主分化能力.結果 人胚胎海馬、皮質、室週、紋狀體部位腦組織均能培養齣具有自我增殖能力的神經榦細胞,其中海馬所含神經榦細胞最豐富,室週次之.BrdU檢測有正在分裂、增殖的細胞.液氮凍存6箇月的細胞複囌後仍具增殖分化能力.細胞貼壁分化後可形成Nestin、膠質原性纖維痠性蛋白(GFAP)、微管相關蛋白2(MAP2)錶達暘性細胞.結論 胚胎腦組織具有豐富的神經榦細胞,具有自我更新和增殖能力,可長期培養.含b-FGF、EGF的無血清培養基能促進神經榦細胞連續穩定增殖,保持神經榦細胞特性.分離培養的神經榦細胞可嚮神經元、膠質細胞分化.
목적 연구인배태신경간세포체외장기배양적조건、불동부위뇌조직신경간세포수량급기분화능력화특점.방법 분리인배태해마、피질、실주、문상체뇌조직,배양재함감성성섬유세포생장인자(b-FGF)、표피생장인자(EGF)、B27、N2첨가제적무혈청배양기중,형성신경구,용유한희석법진행극륭、전대.계산신경구수량,용추탈양뇨감(BrdU)표기신경구,사용면역세포화학법감정신경간세포자주분화능력.결과 인배태해마、피질、실주、문상체부위뇌조직균능배양출구유자아증식능력적신경간세포,기중해마소함신경간세포최봉부,실주차지.BrdU검측유정재분렬、증식적세포.액담동존6개월적세포복소후잉구증식분화능력.세포첩벽분화후가형성Nestin、효질원성섬유산성단백(GFAP)、미관상관단백2(MAP2)표체양성세포.결론 배태뇌조직구유봉부적신경간세포,구유자아경신화증식능력,가장기배양.함b-FGF、EGF적무혈청배양기능촉진신경간세포련속은정증식,보지신경간세포특성.분리배양적신경간세포가향신경원、효질세포분화.