江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
6期
70-72
,共3页
杨杰%张海涛%翟频%白文霞%潘孝青%邵乐
楊傑%張海濤%翟頻%白文霞%潘孝青%邵樂
양걸%장해도%적빈%백문하%반효청%소악
早孕因子%家兔%原核表达%蛋白纯化
早孕因子%傢兔%原覈錶達%蛋白純化
조잉인자%가토%원핵표체%단백순화
通过已构建的含家兔早孕蛋白因子(EPF)基因的重组表达质粒,转化大肠杆菌Rosseta( DE3),在IPTG诱导下表达硫氧还原蛋白-家兔早孕因子融合蛋白( Trx - EPF).结果显示蛋白表达量占菌体总蛋白的30％左右.重组家兔早孕因子融合蛋白(Trx-EPF)经过Ni2+柱纯化、柱上复性,浓缩以后溶液中蛋白浓度达到10 mg/mL,复性率达到13.1％.SDS - PAGE及Western Blot分析表明,在分子量30 ku左右处有一特异性蛋白条带.
通過已構建的含傢兔早孕蛋白因子(EPF)基因的重組錶達質粒,轉化大腸桿菌Rosseta( DE3),在IPTG誘導下錶達硫氧還原蛋白-傢兔早孕因子融閤蛋白( Trx - EPF).結果顯示蛋白錶達量佔菌體總蛋白的30％左右.重組傢兔早孕因子融閤蛋白(Trx-EPF)經過Ni2+柱純化、柱上複性,濃縮以後溶液中蛋白濃度達到10 mg/mL,複性率達到13.1％.SDS - PAGE及Western Blot分析錶明,在分子量30 ku左右處有一特異性蛋白條帶.
통과이구건적함가토조잉단백인자(EPF)기인적중조표체질립,전화대장간균Rosseta( DE3),재IPTG유도하표체류양환원단백-가토조잉인자융합단백( Trx - EPF).결과현시단백표체량점균체총단백적30％좌우.중조가토조잉인자융합단백(Trx-EPF)경과Ni2+주순화、주상복성,농축이후용액중단백농도체도10 mg/mL,복성솔체도13.1％.SDS - PAGE급Western Blot분석표명,재분자량30 ku좌우처유일특이성단백조대.
