农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2011年
5期
823-831
,共9页
苦瓜%Mp-21.6蛋白%分离纯化%抑菌活性%抗氧化作用
苦瓜%Mp-21.6蛋白%分離純化%抑菌活性%抗氧化作用
고과%Mp-21.6단백%분리순화%억균활성%항양화작용
为研究苦瓜蛋白的有效分离技术与抑菌活性,本实验采用(NH4)2SO4分级分离油苦瓜(Momordica charantia L.)蛋白质,将SephadexG-100凝胶柱在DEAE-52阴离子交换柱色谱上作站上串联,分步聚集纯化出苦瓜蛋白Mp-21.6.SDS-PAGE凝胶电泳显示单一蛋白条带;经生化分析鉴定,Mp-21.6 (Momordica protein of 21.6 kD)蛋白的分子量为21.6 kD,等电点pI=9.6;双向还原SDS-PAGE确定苦瓜蛋白Mp-21.6仅存在链内二硫健;Aacomplement软件的基于氨基酸组成比较发现,Mp-21.6类似于RNMC_MOMCH [Ribonuclease MC (RNase MC,EC=3.1.27.1)].抑菌试验显示Mp-21.6对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aure us)、沙门氏菌(Salmonellab sp)、枯草芽胞杆菌(Bacillus sabtilis)、啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和黄曲霉(Aspergillus flavus)产生明显的抑菌活性,其最小抑菌浓度(MIC)远低于苯甲酸钠.随着苦瓜蛋白的逐级分离纯化,其清除羟自由基和总抗氧化能力均有上升的趋势.研究结果提示,苦瓜Mp-21.6蛋白具有广谱抗菌活性及显著的抗氧化能力,利用区隔性分离方式,分级提纯苦瓜的生物活性蛋白,将能开发出有发展潜力的新型抗菌药物.
為研究苦瓜蛋白的有效分離技術與抑菌活性,本實驗採用(NH4)2SO4分級分離油苦瓜(Momordica charantia L.)蛋白質,將SephadexG-100凝膠柱在DEAE-52陰離子交換柱色譜上作站上串聯,分步聚集純化齣苦瓜蛋白Mp-21.6.SDS-PAGE凝膠電泳顯示單一蛋白條帶;經生化分析鑒定,Mp-21.6 (Momordica protein of 21.6 kD)蛋白的分子量為21.6 kD,等電點pI=9.6;雙嚮還原SDS-PAGE確定苦瓜蛋白Mp-21.6僅存在鏈內二硫健;Aacomplement軟件的基于氨基痠組成比較髮現,Mp-21.6類似于RNMC_MOMCH [Ribonuclease MC (RNase MC,EC=3.1.27.1)].抑菌試驗顯示Mp-21.6對大腸桿菌(Escherichia coli)、金黃色葡萄毬菌(Staphylococcus aure us)、沙門氏菌(Salmonellab sp)、枯草芽胞桿菌(Bacillus sabtilis)、啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和黃麯黴(Aspergillus flavus)產生明顯的抑菌活性,其最小抑菌濃度(MIC)遠低于苯甲痠鈉.隨著苦瓜蛋白的逐級分離純化,其清除羥自由基和總抗氧化能力均有上升的趨勢.研究結果提示,苦瓜Mp-21.6蛋白具有廣譜抗菌活性及顯著的抗氧化能力,利用區隔性分離方式,分級提純苦瓜的生物活性蛋白,將能開髮齣有髮展潛力的新型抗菌藥物.
위연구고과단백적유효분리기술여억균활성,본실험채용(NH4)2SO4분급분리유고과(Momordica charantia L.)단백질,장SephadexG-100응효주재DEAE-52음리자교환주색보상작참상천련,분보취집순화출고과단백Mp-21.6.SDS-PAGE응효전영현시단일단백조대;경생화분석감정,Mp-21.6 (Momordica protein of 21.6 kD)단백적분자량위21.6 kD,등전점pI=9.6;쌍향환원SDS-PAGE학정고과단백Mp-21.6부존재련내이류건;Aacomplement연건적기우안기산조성비교발현,Mp-21.6유사우RNMC_MOMCH [Ribonuclease MC (RNase MC,EC=3.1.27.1)].억균시험현시Mp-21.6대대장간균(Escherichia coli)、금황색포도구균(Staphylococcus aure us)、사문씨균(Salmonellab sp)、고초아포간균(Bacillus sabtilis)、비주효모(Saccharomyces cerevisiae)화황곡매(Aspergillus flavus)산생명현적억균활성,기최소억균농도(MIC)원저우분갑산납.수착고과단백적축급분리순화,기청제간자유기화총항양화능력균유상승적추세.연구결과제시,고과Mp-21.6단백구유엄보항균활성급현저적항양화능력,이용구격성분리방식,분급제순고과적생물활성단백,장능개발출유발전잠력적신형항균약물.