安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
32期
19689-19691
,共3页
木聚糖酶%xynA基因%大肠杆菌%重组表达
木聚糖酶%xynA基因%大腸桿菌%重組錶達
목취당매%xynA기인%대장간균%중조표체
通过引物拼接的方式合成采用大肠杆菌优势密码子的疏棉状嗜热丝孢菌木聚糖酶基因xynA,插入到热激质粒pHsh和质粒pET-20b中构建重组质粒pHsh-xynA和pET-20b-xynA,再转入大肠杆菌JM109表达.经热激和IPTG诱导后,木聚糖酶在重组菌中获得特异性表达,产物以胞内可溶性蛋白和包涵体形式存在.重组菌pET-20b-xynA在16℃下表达量最大,胞内酶活达42.13 U/ml,重组菌pHsh-xynA在42℃下胞内酶活最大,为35.06 U/ml.与质粒pHsh相比,pET-20b质粒更有利于重组木聚糖酶的表达.
通過引物拼接的方式閤成採用大腸桿菌優勢密碼子的疏棉狀嗜熱絲孢菌木聚糖酶基因xynA,插入到熱激質粒pHsh和質粒pET-20b中構建重組質粒pHsh-xynA和pET-20b-xynA,再轉入大腸桿菌JM109錶達.經熱激和IPTG誘導後,木聚糖酶在重組菌中穫得特異性錶達,產物以胞內可溶性蛋白和包涵體形式存在.重組菌pET-20b-xynA在16℃下錶達量最大,胞內酶活達42.13 U/ml,重組菌pHsh-xynA在42℃下胞內酶活最大,為35.06 U/ml.與質粒pHsh相比,pET-20b質粒更有利于重組木聚糖酶的錶達.
통과인물병접적방식합성채용대장간균우세밀마자적소면상기열사포균목취당매기인xynA,삽입도열격질립pHsh화질립pET-20b중구건중조질립pHsh-xynA화pET-20b-xynA,재전입대장간균JM109표체.경열격화IPTG유도후,목취당매재중조균중획득특이성표체,산물이포내가용성단백화포함체형식존재.중조균pET-20b-xynA재16℃하표체량최대,포내매활체42.13 U/ml,중조균pHsh-xynA재42℃하포내매활최대,위35.06 U/ml.여질립pHsh상비,pET-20b질립경유리우중조목취당매적표체.
