甲型H1N1流感病毒HA蛋白的截短表达、纯化及鉴定
갑형H1N1류감병독HA단백적절단표체、순화급감정
Expression, Purification and Identification of Truncated Hemagglutinin (HA) of Influenza A/H1N1/2009 Virus
  • 万方数据
    动物医学进展 동물의학진전
    PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
    2011年 5期 22-25 ,共4页

    贾园%沈阳%邱亚峰%史子学%邵东华%王晓杜%邓绪芳%王皓婷%赵福广

    가완%침양%구아봉%사자학%소동화%왕효두%산서방%왕호정%조복엄

    甲型H1N1流感病毒%HA蛋白%原核表达 甲型H1N1流感病毒%HA蛋白%原覈錶達
    갑형H1N1류감병독%HA단백%원핵표체
    构建pET表达载体,通过原核表达系统制备甲型H1N1流感病毒HA的截短表达蛋白,获得纯化蛋白,并分析HA蛋白的反应原性.人工合成A/California/04/2009 H1N1流感病毒HA基因,以其为模板,PCR扩增HA的一部分基因,去除HA蛋白信号肽、跨膜区、胞内区的基因序列,仅扩增HA1和HA2的基因.将扩增的基因构建到pET 28(a)质粒上,重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达HA蛋白,并经过Ni-NTA His Bind柱对其进行纯化,SDS-PAGE电泳鉴定HA蛋白的表达,Western blot 鉴定HA蛋白的反应原性.通过原核表达获得了HA的截短表达蛋白,并制备了较高纯度的蛋白,Western blot显示HA蛋白具有很好的反应原性,为建立甲型H1N1流感病毒检测技术奠定了基础.
    구건pET표체재체,통과원핵표체계통제비갑형H1N1류감병독HA적절단표체단백,획득순화단백,병분석HA단백적반응원성.인공합성A/California/04/2009 H1N1류감병독HA기인,이기위모판,PCR확증HA적일부분기인,거제HA단백신호태、과막구、포내구적기인서렬,부확증HA1화HA2적기인.장확증적기인구건도pET 28(a)질립상,중조질립전화대장애희균BL21(DE3),IPTG유도표체HA단백,병경과Ni-NTA His Bind주대기진행순화,SDS-PAGE전영감정HA단백적표체,Western blot 감정HA단백적반응원성.통과원핵표체획득료HA적절단표체단백,병제비료교고순도적단백,Western blot현시HA단백구유흔호적반응원성,위건립갑형H1N1류감병독검측기술전정료기출.
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