CAJ | 학술논문

目的研究重组腺相关病毒(rAAV)协同重组腺病毒(AdV)在体内增强目的基因表达的强度及时间变化.方法人EB病毒阳性鼻咽癌细胞株C666-1接种于裸鼠皮下,待肿瘤直径达到3 mm左右以rAAV-EGFP 1.5×1011v.g(病毒基因组数,virus genome)、rAdV-EGFP2.5×108pfu或其等量混合液采用瘤内注射,于注射后第5天、10天分别处死裸鼠,取注射点周围肿瘤组织以10%PBS福尔马林固定,用免疫组化方法检测GFP表达情况,在400×光学显微镜下计数具有代表性的10个视野下的阳性细胞比例及强度,采用SPSS10.0单项方差分析统计结果.结果免疫组化提示瘤内注射病毒后第5天rAAV组开始表达目的基因(1.70±0.48),rAdV组目的基因表达达到高峰(6.00±1.94),联合组表达量与AdV组基本一致(6.90±1.92);第10天rAdV组目的基因表达基本消失(2.00±0.67),rAAV组表达明显升高(8.00±1.15),联合组持续高表达(10.10±1.63),且较rAAV组有显著差异(P=0.001).结论 rAAV协同rAdV能够显著提高目的基因的表达量,能够使目的基因表达迅速且维持较长时间,可相互弥补两种病毒的不足,是一种值得推荐的基因表达方式.
목적 연구중조선상관병독(rAAV)협동중조선병독(AdV)재체내증강목적 기인표체적강도급시간변화.방법 인EB병독양성비인암세포주C666-1접충우라서피하,대종류직경체도3 mm좌우이rAAV-EGFP 1.5×1011v.g(병독기인조수,virus genome)、rAdV-EGFP2.5×108pfu혹기등량혼합액채용류내주사,우주사후제5천、10천분별처사라서,취주사점주위종류조직이10%PBS복이마림고정,용면역조화방법검측GFP표체정황,재400×광학현미경하계수구유대표성적10개시야하적양성세포비례급강도,채용SPSS10.0단항방차분석통계결과.결과 면역조화제시류내주사병독후제5천rAAV조개시표체목적 기인(1.70±0.48),rAdV조목적 기인표체체도고봉(6.00±1.94),연합조표체량여AdV조기본일치(6.90±1.92);제10천rAdV조목적 기인표체기본소실(2.00±0.67),rAAV조표체명현승고(8.00±1.15),연합조지속고표체(10.10±1.63),차교rAAV조유현저차이(P=0.001).결론 rAAV협동rAdV능구현저제고목적 기인적표체량,능구사목적 기인표체신속차유지교장시간,가상호미보량충병독적불족,시일충치득추천적기인표체방식.