CAJ | 학술논문

目的观察酒精诱导PCI2细胞凋亡及其凋亡过程中神经鞘磷脂合酶活性和mRNA表达量的变化.方法 MTr法测定酒精对PCI2细胞增殖的抑制作用.Hoeelmt33258染色荧光显微镜观察PCI2细胞凋亡形态学变化.DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡梯状DNA条带.RT-PCR法检测酒精对PCI2细胞SMSI和SMS2 mRNA表达的影响.薄层层析法测定SMS的活性.结果 PCI2细胞去血清培养24 h,酒精浓度在100、200、400和800 mmoL/L时,细胞存活率分别是单纯去血清的87.54%、70.73%、57.89%和51.70%,表现出较强的细胞增殖抑制作用(P<0.05);细胞核形态学变化显示酒精处理组凋亡细胞增多,表现染色质凝集,细胞核变小、核碎裂成碎片等典型细胞凋亡特征性变化,凋亡率随着酒精浓度的增大而升高,去血清组的酒精浓度为100、200和300 mmol/L时,细胞凋亡率呈剂量依赖关系;琼脂糖凝胶电泳可见酒精处理组有不同程度的DNA断裂,显示凋亡细胞典型的梯状DNA.RT-PCR检测酒精对PCI2细胞SMS转录水平结果显示,不同浓度酒精作用于PCI2细胞0.5 h,SMSI表达量无显著变化,当作用时间达1h和2 h,SMSl表达量显著增加,并呈剂量依赖性,而SMS2的mRNA表达则不受酒精作用的影响;薄层层析法检测细胞总SMS活性显示,不同浓度酒精作用2 h,细胞SMS活性随酒精浓度增加而升高.结论酒精可导致PCI2细胞凋亡并与酒精浓度呈正相关.酒精致PCI2细胞凋亡过程中SMSl的mRNA表达量增高,酶活性增强,提示酒精致PCI2细胞凋亡作用与鞘磷脂循环有关.
목적 관찰주정유도PCI2세포조망급기조망과정중신경초린지합매활성화mRNA표체량적변화.방법 MTr법측정주정대PCI2세포증식적억제작용.Hoeelmt33258염색형광현미경관찰PCI2세포조망형태학변화.DNA경지당응효전영검측세포조망제상DNA조대.RT-PCR법검측주정대PCI2세포SMSI화SMS2 mRNA표체적영향.박층층석법측정SMS적활성.결과 PCI2세포거혈청배양24 h,주정농도재100、200、400화800 mmoL/L시,세포존활솔분별시단순거혈청적87.54%、70.73%、57.89%화51.70%,표현출교강적세포증식억제작용(P<0.05);세포핵형태학변화현시주정처리조조망세포증다,표현염색질응집,세포핵변소、핵쇄렬성쇄편등전형세포조망특정성변화,조망솔수착주정농도적증대이승고,거혈청조적주정농도위100、200화300 mmol/L시,세포조망솔정제량의뢰관계;경지당응효전영가견주정처리조유불동정도적DNA단렬,현시조망세포전형적제상DNA.RT-PCR검측주정대PCI2세포SMS전록수평결과현시,불동농도주정작용우PCI2세포0.5 h,SMSI표체량무현저변화,당작용시간체1h화2 h,SMSl표체량현저증가,병정제량의뢰성,이SMS2적mRNA표체칙불수주정작용적영향;박층층석법검측세포총SMS활성현시,불동농도주정작용2 h,세포SMS활성수주정농도증가이승고.결론 주정가도치PCI2세포조망병여주정농도정정상관.주정치PCI2세포조망과정중SMSl적mRNA표체량증고,매활성증강,제시주정치PCI2세포조망작용여초린지순배유관.