成都医学院学报
成都醫學院學報
성도의학원학보
JOURNAL OF CHENGDU MEDICAL COLLEGE
2010年
4期
317-320
,共4页
李燕%宋瑱%冷平%熊辉%何洋
李燕%宋瑱%冷平%熊輝%何洋
리연%송진%랭평%웅휘%하양
抑制消减杂交%DNA文库%肺炎链球菌%多耐药
抑製消減雜交%DNA文庫%肺炎鏈毬菌%多耐藥
억제소감잡교%DNA문고%폐염련구균%다내약
目的 筛选肺炎链球菌多耐药相关DNA片段,探索肺炎链球菌多耐药的分子机制.方法 提取多耐药菌株09062407与标准菌株ATCC49619基因组DNA,应用抑制性消减杂交技术得到富含差异DNA片段的消减混合物,与pEASY-T3克隆载体连接并转化到TP10感受态细胞中,构建多耐药肺炎链球菌差异DNA消减文库.结果 耐药株与敏感株间差异片段大量富集,得到大小200～1 500 bp弥散状DNA条带;将这些差异DNA片段富集后构建成消减文库,随机挑取192个白色克隆,经PCR扩增,155个克隆插入有200～800 bp大小片段.结论 抑制消减杂交技术能有效筛选肺炎链球菌多耐药株与敏感株间差异DNA片段,可进一步通过克隆鉴定等生物信息学方法 寻找与肺炎链球菌多耐药相关基因.
目的 篩選肺炎鏈毬菌多耐藥相關DNA片段,探索肺炎鏈毬菌多耐藥的分子機製.方法 提取多耐藥菌株09062407與標準菌株ATCC49619基因組DNA,應用抑製性消減雜交技術得到富含差異DNA片段的消減混閤物,與pEASY-T3剋隆載體連接併轉化到TP10感受態細胞中,構建多耐藥肺炎鏈毬菌差異DNA消減文庫.結果 耐藥株與敏感株間差異片段大量富集,得到大小200～1 500 bp瀰散狀DNA條帶;將這些差異DNA片段富集後構建成消減文庫,隨機挑取192箇白色剋隆,經PCR擴增,155箇剋隆插入有200～800 bp大小片段.結論 抑製消減雜交技術能有效篩選肺炎鏈毬菌多耐藥株與敏感株間差異DNA片段,可進一步通過剋隆鑒定等生物信息學方法 尋找與肺炎鏈毬菌多耐藥相關基因.
목적 사선폐염련구균다내약상관DNA편단,탐색폐염련구균다내약적분자궤제.방법 제취다내약균주09062407여표준균주ATCC49619기인조DNA,응용억제성소감잡교기술득도부함차이DNA편단적소감혼합물,여pEASY-T3극륭재체련접병전화도TP10감수태세포중,구건다내약폐염련구균차이DNA소감문고.결과 내약주여민감주간차이편단대량부집,득도대소200～1 500 bp미산상DNA조대;장저사차이DNA편단부집후구건성소감문고,수궤도취192개백색극륭,경PCR확증,155개극륭삽입유200～800 bp대소편단.결론 억제소감잡교기술능유효사선폐염련구균다내약주여민감주간차이DNA편단,가진일보통과극륭감정등생물신식학방법 심조여폐염련구균다내약상관기인.
