延边大学农学学报
延邊大學農學學報
연변대학농학학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCE YANBIAN UNIVERSITY
2010年
1期
44-47
,共4页
李烨%李熙英%车彩凤%吕龙石
李燁%李熙英%車綵鳳%呂龍石
리엽%리희영%차채봉%려룡석
人参黑斑病菌%基因组DNA,RAPD%体系优化
人參黑斑病菌%基因組DNA,RAPD%體繫優化
인삼흑반병균%기인조DNA,RAPD%체계우화
采用改良的CTAB法提取人参黑斑病菌的基因组DNA,建立人参黑斑病菌RAPD反应的体系.最佳体系容积为25 μL,其中包括10×Taq配套缓冲液2.5 μL,模板DNA 20 ng/μL,引物15 pmol/L,dNTP 150 μmol/L,Taq DNA聚合酶1 U,Mg2+1.5 mmol/L,其余部分用DW补充.PCR扩增程序为:94 ℃预变性5 min,94 ℃变性1 min,40 ℃退火1 min,72 ℃延伸2 min,40次循环,72 ℃延伸7 min.
採用改良的CTAB法提取人參黑斑病菌的基因組DNA,建立人參黑斑病菌RAPD反應的體繫.最佳體繫容積為25 μL,其中包括10×Taq配套緩遲液2.5 μL,模闆DNA 20 ng/μL,引物15 pmol/L,dNTP 150 μmol/L,Taq DNA聚閤酶1 U,Mg2+1.5 mmol/L,其餘部分用DW補充.PCR擴增程序為:94 ℃預變性5 min,94 ℃變性1 min,40 ℃退火1 min,72 ℃延伸2 min,40次循環,72 ℃延伸7 min.
채용개량적CTAB법제취인삼흑반병균적기인조DNA,건립인삼흑반병균RAPD반응적체계.최가체계용적위25 μL,기중포괄10×Taq배투완충액2.5 μL,모판DNA 20 ng/μL,인물15 pmol/L,dNTP 150 μmol/L,Taq DNA취합매1 U,Mg2+1.5 mmol/L,기여부분용DW보충.PCR확증정서위:94 ℃예변성5 min,94 ℃변성1 min,40 ℃퇴화1 min,72 ℃연신2 min,40차순배,72 ℃연신7 min.
