南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2008年
12期
2146-2149
,共4页
尤长宣%苏瑾%廖旺军%张军一%Liu Yong%Paul L Hermonat%罗荣城
尤長宣%囌瑾%廖旺軍%張軍一%Liu Yong%Paul L Hermonat%囉榮城
우장선%소근%료왕군%장군일%Liu Yong%Paul L Hermonat%라영성
乳腺癌%BA46%腺相关病毒%特异细胞免疫
乳腺癌%BA46%腺相關病毒%特異細胞免疫
유선암%BA46%선상관병독%특이세포면역
目的 探讨以腺相关病毒为载体,乳腺癌抗原BA46基因转染树突状细胞(DC)诱导特异细胞免疫的可行性.方法 取健康人外周血,采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(DC前体细胞),将细胞分为基冈转染组及对照组,基因转染组以重组腺相关病毒rAAV/BA46/Neo转染,对照组以293细胞裂解物冲击.两组细胞均采用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导DC前体细胞成熟.第7天,收集DC,取该DC与T细胞按比例混合,诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL),用3H-TdR掺入法检测DC刺激自体淋巴细胞增殖能力;以流式细胞仪分析CTL细胞中IFN-γ、IL-4、CD4、CD8、CD25、CD69的表达情况,同时取BA46阳性的乳腺癌细胞株Hs578T为靶细胞,采用51Cr释放法检测杀伤效率.结果 BA46基凶转染组DC具备较强的刺激淋巴细胞增殖的能力,所诱导的CTL高表达CD8、CD69和IFN-γ,对BA46阳性的靶细胞有较强的杀伤作用,该杀伤具有BA46抗原特异性和MHC限制性.结论 乳腺癌BA46基因转染DC成功诱导特异的细胞免疫.为基因修饰细胞治疗乳腺癌打下实验室基础.
目的 探討以腺相關病毒為載體,乳腺癌抗原BA46基因轉染樹突狀細胞(DC)誘導特異細胞免疫的可行性.方法 取健康人外週血,採用密度梯度離心法分離外週血單箇覈細胞(DC前體細胞),將細胞分為基岡轉染組及對照組,基因轉染組以重組腺相關病毒rAAV/BA46/Neo轉染,對照組以293細胞裂解物遲擊.兩組細胞均採用重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)、白細胞介素4(IL-4)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)誘導DC前體細胞成熟.第7天,收集DC,取該DC與T細胞按比例混閤,誘導細胞毒性T淋巴細胞(CTL),用3H-TdR摻入法檢測DC刺激自體淋巴細胞增殖能力;以流式細胞儀分析CTL細胞中IFN-γ、IL-4、CD4、CD8、CD25、CD69的錶達情況,同時取BA46暘性的乳腺癌細胞株Hs578T為靶細胞,採用51Cr釋放法檢測殺傷效率.結果 BA46基兇轉染組DC具備較彊的刺激淋巴細胞增殖的能力,所誘導的CTL高錶達CD8、CD69和IFN-γ,對BA46暘性的靶細胞有較彊的殺傷作用,該殺傷具有BA46抗原特異性和MHC限製性.結論 乳腺癌BA46基因轉染DC成功誘導特異的細胞免疫.為基因脩飾細胞治療乳腺癌打下實驗室基礎.
목적 탐토이선상관병독위재체,유선암항원BA46기인전염수돌상세포(DC)유도특이세포면역적가행성.방법 취건강인외주혈,채용밀도제도리심법분리외주혈단개핵세포(DC전체세포),장세포분위기강전염조급대조조,기인전염조이중조선상관병독rAAV/BA46/Neo전염,대조조이293세포렬해물충격.량조세포균채용중조인립세포거서세포집락자격인자(GM-CSF)、백세포개소4(IL-4)、종류배사인자-α(TNF-α)유도DC전체세포성숙.제7천,수집DC,취해DC여T세포안비례혼합,유도세포독성T림파세포(CTL),용3H-TdR참입법검측DC자격자체림파세포증식능력;이류식세포의분석CTL세포중IFN-γ、IL-4、CD4、CD8、CD25、CD69적표체정황,동시취BA46양성적유선암세포주Hs578T위파세포,채용51Cr석방법검측살상효솔.결과 BA46기흉전염조DC구비교강적자격림파세포증식적능력,소유도적CTL고표체CD8、CD69화IFN-γ,대BA46양성적파세포유교강적살상작용,해살상구유BA46항원특이성화MHC한제성.결론 유선암BA46기인전염DC성공유도특이적세포면역.위기인수식세포치료유선암타하실험실기출.
