中国比较医学杂志
中國比較醫學雜誌
중국비교의학잡지
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
2008年
11期
44-49
,共6页
刘月环%楼琦%金晓音%郭红刚%石巧娟
劉月環%樓琦%金曉音%郭紅剛%石巧娟
류월배%루기%금효음%곽홍강%석교연
兔病毒性出血症病毒%衣壳蛋白基因%遗传变异%RT-PCR
兔病毒性齣血癥病毒%衣殼蛋白基因%遺傳變異%RT-PCR
토병독성출혈증병독%의각단백기인%유전변이%RT-PCR
目的 获得兔出血症病毒(浙江分离株)近20年间遗传变异概况,建立兔出血症病毒的RT-PCR检测方法.方法 对1989~2006年间的7株RHDV浙江分离株的衣壳蛋白基因(VP60)进行了克隆与测序,并与国内、外RHDV的基因组序列进行了遗传比对和分析;根据兔出血症病毒株的VP60设计引物,对20只人工感染兔的实质脏器、全血和350只实验兔全血样本进行了检测.结果 7株RHDV的VP60基因均由1740个核苷酸组成,编码580个氨基酸.它们与参考序列之间的氨基酸同源性为94.0%~99.8%.系统发生树分析结果显示,RHDV可划分为2个大的基因群,浙江(中国)的RHDV分离株主要集中于C亚群.RT-PCR检测方法表明20只实验兔全部扩出预期条带,而350只实验兔全血检测中出现13只RHDV可疑样本.经血凝抑制试验检测,13例PCR阳性样品中有10个HAI阳性,3个阴性.检测敏感度达100%.特异性为99.12%,经统计检验,kappa=0.865,表明PCR检出RHDV的结果与HAI高度一致.结论 RHDV基因群之间的遗传距离有逐渐加大的趋势.我们建立的RT-PCR法可用于RHDV浙江分离株的检测,用RT-PCR检测全血中RHDV方法的建立为活体检测RHDV打下了基础.
目的 穫得兔齣血癥病毒(浙江分離株)近20年間遺傳變異概況,建立兔齣血癥病毒的RT-PCR檢測方法.方法 對1989~2006年間的7株RHDV浙江分離株的衣殼蛋白基因(VP60)進行瞭剋隆與測序,併與國內、外RHDV的基因組序列進行瞭遺傳比對和分析;根據兔齣血癥病毒株的VP60設計引物,對20隻人工感染兔的實質髒器、全血和350隻實驗兔全血樣本進行瞭檢測.結果 7株RHDV的VP60基因均由1740箇覈苷痠組成,編碼580箇氨基痠.它們與參攷序列之間的氨基痠同源性為94.0%~99.8%.繫統髮生樹分析結果顯示,RHDV可劃分為2箇大的基因群,浙江(中國)的RHDV分離株主要集中于C亞群.RT-PCR檢測方法錶明20隻實驗兔全部擴齣預期條帶,而350隻實驗兔全血檢測中齣現13隻RHDV可疑樣本.經血凝抑製試驗檢測,13例PCR暘性樣品中有10箇HAI暘性,3箇陰性.檢測敏感度達100%.特異性為99.12%,經統計檢驗,kappa=0.865,錶明PCR檢齣RHDV的結果與HAI高度一緻.結論 RHDV基因群之間的遺傳距離有逐漸加大的趨勢.我們建立的RT-PCR法可用于RHDV浙江分離株的檢測,用RT-PCR檢測全血中RHDV方法的建立為活體檢測RHDV打下瞭基礎.
목적 획득토출혈증병독(절강분리주)근20년간유전변이개황,건립토출혈증병독적RT-PCR검측방법.방법 대1989~2006년간적7주RHDV절강분리주적의각단백기인(VP60)진행료극륭여측서,병여국내、외RHDV적기인조서렬진행료유전비대화분석;근거토출혈증병독주적VP60설계인물,대20지인공감염토적실질장기、전혈화350지실험토전혈양본진행료검측.결과 7주RHDV적VP60기인균유1740개핵감산조성,편마580개안기산.타문여삼고서렬지간적안기산동원성위94.0%~99.8%.계통발생수분석결과현시,RHDV가화분위2개대적기인군,절강(중국)적RHDV분리주주요집중우C아군.RT-PCR검측방법표명20지실험토전부확출예기조대,이350지실험토전혈검측중출현13지RHDV가의양본.경혈응억제시험검측,13례PCR양성양품중유10개HAI양성,3개음성.검측민감도체100%.특이성위99.12%,경통계검험,kappa=0.865,표명PCR검출RHDV적결과여HAI고도일치.결론 RHDV기인군지간적유전거리유축점가대적추세.아문건립적RT-PCR법가용우RHDV절강분리주적검측,용RT-PCR검측전혈중RHDV방법적건립위활체검측RHDV타하료기출.