细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
11期
1113-1115
,共3页
王勇%张科%童继春%钱科卿%史央%陆俊欢%时宏珍
王勇%張科%童繼春%錢科卿%史央%陸俊歡%時宏珍
왕용%장과%동계춘%전과경%사앙%륙준환%시굉진
树突状细胞%肺癌%疫苗
樹突狀細胞%肺癌%疫苗
수돌상세포%폐암%역묘
目的:建立自体热休克凋亡肺癌细胞抗原制备、树突状细胞(DC)体外诱导、以及抗原负载方法, 为制备DC肿瘤疫苗提供技术基础.方法:采用酶消化法从手术切除的肺癌新鲜组织获得单细胞悬液, 热休克后用白桦脂酸诱导其凋亡制备成细胞抗原;采用血细胞分离机采集外周血单个核细胞(PBMC), 贴壁法获得单核细胞, 经GM-CSF与IL- 4体外诱导成未成熟树突状细胞(imDC);负载细胞抗原后制备成DC肿瘤疫苗, 并对DC疫苗的形态、数量及表型特征进行分析.结果:(1)肿瘤细胞抗原得率:(13.68±1.30)×106/g组织;平均凋亡率:(93.79±2.31)%;(2)imDC平均得率为(9.37±0.83)×106/(118.77±12.56)×106个PBMC, 活率>95%;imDC表型分析:CD11c+CD14-、 CD11c+HLA-DR+、 CD11c+CD80+、 CD11c+CD83+、 CD11c+CD86+ 表达率分别为(87.45±3.42)%、 (87.16±1.08)%、 (2.80±1.52)%、 (5.64±1.56)%、 (5.11±1.09)%;(3)DC疫苗平均得率为(5.75±0.69)×106/(9.37±0.83)×106个imDC, 活率>95%, DC疫苗表型:CD11c+CD14-、 CD11c+HLA-DR+、 CD11c+CD80+、 CD11c+CD83+、 CD11c+CD86+ 表达率分别为(92.73±1.21)%、 (89.35±2.31)%、 (86.80±1.23)%、 (69.53±7.21)%、 (94.92±1.48)%. 结论:该方法稳定、安全、可靠, 可制备出具有成熟DC表型的肿瘤疫苗.
目的:建立自體熱休剋凋亡肺癌細胞抗原製備、樹突狀細胞(DC)體外誘導、以及抗原負載方法, 為製備DC腫瘤疫苗提供技術基礎.方法:採用酶消化法從手術切除的肺癌新鮮組織穫得單細胞懸液, 熱休剋後用白樺脂痠誘導其凋亡製備成細胞抗原;採用血細胞分離機採集外週血單箇覈細胞(PBMC), 貼壁法穫得單覈細胞, 經GM-CSF與IL- 4體外誘導成未成熟樹突狀細胞(imDC);負載細胞抗原後製備成DC腫瘤疫苗, 併對DC疫苗的形態、數量及錶型特徵進行分析.結果:(1)腫瘤細胞抗原得率:(13.68±1.30)×106/g組織;平均凋亡率:(93.79±2.31)%;(2)imDC平均得率為(9.37±0.83)×106/(118.77±12.56)×106箇PBMC, 活率>95%;imDC錶型分析:CD11c+CD14-、 CD11c+HLA-DR+、 CD11c+CD80+、 CD11c+CD83+、 CD11c+CD86+ 錶達率分彆為(87.45±3.42)%、 (87.16±1.08)%、 (2.80±1.52)%、 (5.64±1.56)%、 (5.11±1.09)%;(3)DC疫苗平均得率為(5.75±0.69)×106/(9.37±0.83)×106箇imDC, 活率>95%, DC疫苗錶型:CD11c+CD14-、 CD11c+HLA-DR+、 CD11c+CD80+、 CD11c+CD83+、 CD11c+CD86+ 錶達率分彆為(92.73±1.21)%、 (89.35±2.31)%、 (86.80±1.23)%、 (69.53±7.21)%、 (94.92±1.48)%. 結論:該方法穩定、安全、可靠, 可製備齣具有成熟DC錶型的腫瘤疫苗.
목적:건립자체열휴극조망폐암세포항원제비、수돌상세포(DC)체외유도、이급항원부재방법, 위제비DC종류역묘제공기술기출.방법:채용매소화법종수술절제적폐암신선조직획득단세포현액, 열휴극후용백화지산유도기조망제비성세포항원;채용혈세포분리궤채집외주혈단개핵세포(PBMC), 첩벽법획득단핵세포, 경GM-CSF여IL- 4체외유도성미성숙수돌상세포(imDC);부재세포항원후제비성DC종류역묘, 병대DC역묘적형태、수량급표형특정진행분석.결과:(1)종류세포항원득솔:(13.68±1.30)×106/g조직;평균조망솔:(93.79±2.31)%;(2)imDC평균득솔위(9.37±0.83)×106/(118.77±12.56)×106개PBMC, 활솔>95%;imDC표형분석:CD11c+CD14-、 CD11c+HLA-DR+、 CD11c+CD80+、 CD11c+CD83+、 CD11c+CD86+ 표체솔분별위(87.45±3.42)%、 (87.16±1.08)%、 (2.80±1.52)%、 (5.64±1.56)%、 (5.11±1.09)%;(3)DC역묘평균득솔위(5.75±0.69)×106/(9.37±0.83)×106개imDC, 활솔>95%, DC역묘표형:CD11c+CD14-、 CD11c+HLA-DR+、 CD11c+CD80+、 CD11c+CD83+、 CD11c+CD86+ 표체솔분별위(92.73±1.21)%、 (89.35±2.31)%、 (86.80±1.23)%、 (69.53±7.21)%、 (94.92±1.48)%. 결론:해방법은정、안전、가고, 가제비출구유성숙DC표형적종류역묘.
