生物加工过程
生物加工過程
생물가공과정
CHINESE JOURNAL OF BIOPROCESS ENGINEERING
2008年
5期
55-59
,共5页
纪卿%丁虎生%杨炼%王铁斌%张灏%陈卫
紀卿%丁虎生%楊煉%王鐵斌%張灝%陳衛
기경%정호생%양련%왕철빈%장호%진위
幽门螺旋杆菌%噬茵体展示%scFv%细胞筛选%ELISA
幽門螺鏇桿菌%噬茵體展示%scFv%細胞篩選%ELISA
유문라선간균%서인체전시%scFv%세포사선%ELISA
为了获得幽门螺旋杆菌特异性单链抗体scFv,通过噬茵体展示技术,首次直接用幽门螺旋杆菌细胞Hp对噬菌体单链抗体文库Tomlinson进行单链抗体的筛选,经5轮筛选后,通过ELISA方法检测.从随机挑选的96个克隆中获得了8株阳性克隆.再分别将阳性克隆与10种常见菌进行ELISA的交叉反应,最终得到1株特异性表达抗Hp的scFv的噬菌体JH1.随后又进一步对JH1所表达的scFv基因进行PCR扩增,分别得到scFv的VH片段、VL片段,全长基因分别为527bp、368bp和935bp,这些包含着部分载体序列的DNA片段与理论值相符.通过对seFv全长基因进行测序,在NCBI中进行基因序列比对,与已报道的一种植物RNA病毒的复制酶单链抗体基因序列有96%同源性.
為瞭穫得幽門螺鏇桿菌特異性單鏈抗體scFv,通過噬茵體展示技術,首次直接用幽門螺鏇桿菌細胞Hp對噬菌體單鏈抗體文庫Tomlinson進行單鏈抗體的篩選,經5輪篩選後,通過ELISA方法檢測.從隨機挑選的96箇剋隆中穫得瞭8株暘性剋隆.再分彆將暘性剋隆與10種常見菌進行ELISA的交扠反應,最終得到1株特異性錶達抗Hp的scFv的噬菌體JH1.隨後又進一步對JH1所錶達的scFv基因進行PCR擴增,分彆得到scFv的VH片段、VL片段,全長基因分彆為527bp、368bp和935bp,這些包含著部分載體序列的DNA片段與理論值相符.通過對seFv全長基因進行測序,在NCBI中進行基因序列比對,與已報道的一種植物RNA病毒的複製酶單鏈抗體基因序列有96%同源性.
위료획득유문라선간균특이성단련항체scFv,통과서인체전시기술,수차직접용유문라선간균세포Hp대서균체단련항체문고Tomlinson진행단련항체적사선,경5륜사선후,통과ELISA방법검측.종수궤도선적96개극륭중획득료8주양성극륭.재분별장양성극륭여10충상견균진행ELISA적교차반응,최종득도1주특이성표체항Hp적scFv적서균체JH1.수후우진일보대JH1소표체적scFv기인진행PCR확증,분별득도scFv적VH편단、VL편단,전장기인분별위527bp、368bp화935bp,저사포함착부분재체서렬적DNA편단여이론치상부.통과대seFv전장기인진행측서,재NCBI중진행기인서렬비대,여이보도적일충식물RNA병독적복제매단련항체기인서렬유96%동원성.
