农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2008年
3期
443-449
,共7页
张翊华%窦忠英%沈文正%杨春荣%高志敏
張翊華%竇忠英%瀋文正%楊春榮%高誌敏
장익화%두충영%침문정%양춘영%고지민
人胎儿%骨髓间充质干细胞%分离培养%生物学特性
人胎兒%骨髓間充質榦細胞%分離培養%生物學特性
인태인%골수간충질간세포%분리배양%생물학특성
人胎儿骨髓间充质干细胞(BMMSCs)的群体倍增次数(70~80次)是成体BMMSCs(30~40次)的2倍,分化能力优于成体干细胞.研究采取纵向剪开骨髓腔涮洗细胞法和全骨髓培养法分离2~3月龄流产胎儿BMMSCs,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)筛选基础培养液和血清浓度并制作生长曲线,流式细胞仪和免疫组织化学法鉴定细胞抗原标志,并通过核型分析和成瘤实验评估细胞的安全性.结果表明,沿长轴剪开骨髓腔涮洗细胞法是获得2~3月龄人流产胎儿四肢长骨骨髓的实用方法.在实验范围内α-MEM(minimum essential medium alpha medium)+20%FCS(fetal cattle serum)是体外培养2~3月龄流产胎儿BMMSCs的最佳体系.分离的第3代BMMSCs除表达成体BMMSCs表面抗原标志外还表达Oct4、SSEA3和SSEA4,第6、12和24代细胞在对数增长期的群体倍增时间分别为34、36和40h,且均为二倍体核型、不成瘤.这证明2~3月龄人流产胎儿BMMSCs可以成为人类组织工程和再生医学研究理想的种子细胞.
人胎兒骨髓間充質榦細胞(BMMSCs)的群體倍增次數(70~80次)是成體BMMSCs(30~40次)的2倍,分化能力優于成體榦細胞.研究採取縱嚮剪開骨髓腔涮洗細胞法和全骨髓培養法分離2~3月齡流產胎兒BMMSCs,四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT法)篩選基礎培養液和血清濃度併製作生長麯線,流式細胞儀和免疫組織化學法鑒定細胞抗原標誌,併通過覈型分析和成瘤實驗評估細胞的安全性.結果錶明,沿長軸剪開骨髓腔涮洗細胞法是穫得2~3月齡人流產胎兒四肢長骨骨髓的實用方法.在實驗範圍內α-MEM(minimum essential medium alpha medium)+20%FCS(fetal cattle serum)是體外培養2~3月齡流產胎兒BMMSCs的最佳體繫.分離的第3代BMMSCs除錶達成體BMMSCs錶麵抗原標誌外還錶達Oct4、SSEA3和SSEA4,第6、12和24代細胞在對數增長期的群體倍增時間分彆為34、36和40h,且均為二倍體覈型、不成瘤.這證明2~3月齡人流產胎兒BMMSCs可以成為人類組織工程和再生醫學研究理想的種子細胞.
인태인골수간충질간세포(BMMSCs)적군체배증차수(70~80차)시성체BMMSCs(30~40차)적2배,분화능력우우성체간세포.연구채취종향전개골수강쇄세세포법화전골수배양법분리2~3월령유산태인BMMSCs,사갑기우담서염비색법(MTT법)사선기출배양액화혈청농도병제작생장곡선,류식세포의화면역조직화학법감정세포항원표지,병통과핵형분석화성류실험평고세포적안전성.결과표명,연장축전개골수강쇄세세포법시획득2~3월령인유산태인사지장골골수적실용방법.재실험범위내α-MEM(minimum essential medium alpha medium)+20%FCS(fetal cattle serum)시체외배양2~3월령유산태인BMMSCs적최가체계.분리적제3대BMMSCs제표체성체BMMSCs표면항원표지외환표체Oct4、SSEA3화SSEA4,제6、12화24대세포재대수증장기적군체배증시간분별위34、36화40h,차균위이배체핵형、불성류.저증명2~3월령인유산태인BMMSCs가이성위인류조직공정화재생의학연구이상적충자세포.