复旦学报（自然科学版）
複旦學報（自然科學版）
복단학보（자연과학판）
JOURNAL OF FUDAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2008年
3期
301-305
,共5页
尹隽%胡志鹏%宋大新%钟江
尹雋%鬍誌鵬%宋大新%鐘江
윤준%호지붕%송대신%종강
杆状病毒%突变体%复制%基因表达
桿狀病毒%突變體%複製%基因錶達
간상병독%돌변체%복제%기인표체
从Tn5转座子介导的AcMNPV随机插入突变体库中,分离到一株复制正常的突变体AcApra41.突变定位发现Tn5转座子插入了病毒p95基因中.为了排除AcApra41中还有其他突变,利用同源重组法构建了p95基因定点插入突变的重组病毒AcGFP-P95in.PCR确认p95基因中插入了Tn5转座子;Western blot也证实AcApra41和AcGFP-P95in感染的细胞中,P95蛋白的分子量都因为插入突变而变小,由野生型的95 ku变为 55 ku.病毒复制动态曲线和荧光显微镜观察证实带有该插入突变的病毒能够在Sf9细胞中正常复制,并表达极晚期基因.这一结果表明完整的P95蛋白对病毒复制是非必须的.
從Tn5轉座子介導的AcMNPV隨機插入突變體庫中,分離到一株複製正常的突變體AcApra41.突變定位髮現Tn5轉座子插入瞭病毒p95基因中.為瞭排除AcApra41中還有其他突變,利用同源重組法構建瞭p95基因定點插入突變的重組病毒AcGFP-P95in.PCR確認p95基因中插入瞭Tn5轉座子;Western blot也證實AcApra41和AcGFP-P95in感染的細胞中,P95蛋白的分子量都因為插入突變而變小,由野生型的95 ku變為 55 ku.病毒複製動態麯線和熒光顯微鏡觀察證實帶有該插入突變的病毒能夠在Sf9細胞中正常複製,併錶達極晚期基因.這一結果錶明完整的P95蛋白對病毒複製是非必鬚的.
종Tn5전좌자개도적AcMNPV수궤삽입돌변체고중,분리도일주복제정상적돌변체AcApra41.돌변정위발현Tn5전좌자삽입료병독p95기인중.위료배제AcApra41중환유기타돌변,이용동원중조법구건료p95기인정점삽입돌변적중조병독AcGFP-P95in.PCR학인p95기인중삽입료Tn5전좌자;Western blot야증실AcApra41화AcGFP-P95in감염적세포중,P95단백적분자량도인위삽입돌변이변소,유야생형적95 ku변위 55 ku.병독복제동태곡선화형광현미경관찰증실대유해삽입돌변적병독능구재Sf9세포중정상복제,병표체겁만기기인.저일결과표명완정적P95단백대병독복제시비필수적.
