细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
6期
586-589
,共4页
董博翰%吴秀丽%尹晓光%王莉%卫红飞%孙陆果%于永利%王丽颖
董博翰%吳秀麗%尹曉光%王莉%衛紅飛%孫陸果%于永利%王麗穎
동박한%오수려%윤효광%왕리%위홍비%손륙과%우영리%왕려영
HSP65-PSA融合蛋白%PSA阳性B16肿瘤细胞%免疫治疗%肿瘤生长抑制
HSP65-PSA融閤蛋白%PSA暘性B16腫瘤細胞%免疫治療%腫瘤生長抑製
HSP65-PSA융합단백%PSA양성B16종류세포%면역치료%종류생장억제
目的:研究热休克蛋白65(HSP65)-前列腺特异性抗原融合蛋白在体外对人树突状细胞的活化作用以及在小鼠体内抑制PSA阳性肿瘤细胞生长的作用.方法:利用Westernblot方法对融合蛋白HSP65-PSA的特异性进行鉴定;利用共聚焦显微镜、流式细胞术(FCM)检测和斑点杂交的方法对PcDNA3-GFP-PSA稳定转染的B16细胞进行鉴定;用HSP65-PSA融合蛋白刺激来自于人外周血的未成熟树突状细胞,观察融合蛋白对树突状细胞的体外活化作用;用PcDNA3-GFP-PSA稳定转染的B16细胞种植C57BL/6小鼠,继而用HSP65-PSA融合蛋白来免疫小鼠以观察融合蛋白对PSA阳性B16肿瘤细胞生长的体内抑制作用.结果:Western blot检测显示融合蛋白HSP65-PSA具有PSA蛋白特异性.共聚焦显微镜、FCM检测和斑点杂交结果均显示PcDNA3-GFP-PSA转染的B16细胞转染情况良好.体外细胞实验显示,将HSP65-PSA融合蛋白作用于人外周血树突状细胞后可以明显促进树突状细胞表面分子CD86的表达,其上调率为52.93%.动物体内实验显示,HSP65-PSA融合蛋白可以明显抑制PSA阳性B16肿瘤细胞在小鼠体内的生长.10 μg蛋白免疫组的肿瘤体积(4.91±5.21)与对照组(10.56±6.10)相比差异有统计学意义(P<0.05).结论:HSP65-PSA融合蛋白可以在体外活化树突状细胞,在小鼠体内抑制PSA阳性B16肿瘤细胞的生长.HSP65-PSA融合蛋白可能具有应用于PSA阳性肿瘤的免疫治疗作用.
目的:研究熱休剋蛋白65(HSP65)-前列腺特異性抗原融閤蛋白在體外對人樹突狀細胞的活化作用以及在小鼠體內抑製PSA暘性腫瘤細胞生長的作用.方法:利用Westernblot方法對融閤蛋白HSP65-PSA的特異性進行鑒定;利用共聚焦顯微鏡、流式細胞術(FCM)檢測和斑點雜交的方法對PcDNA3-GFP-PSA穩定轉染的B16細胞進行鑒定;用HSP65-PSA融閤蛋白刺激來自于人外週血的未成熟樹突狀細胞,觀察融閤蛋白對樹突狀細胞的體外活化作用;用PcDNA3-GFP-PSA穩定轉染的B16細胞種植C57BL/6小鼠,繼而用HSP65-PSA融閤蛋白來免疫小鼠以觀察融閤蛋白對PSA暘性B16腫瘤細胞生長的體內抑製作用.結果:Western blot檢測顯示融閤蛋白HSP65-PSA具有PSA蛋白特異性.共聚焦顯微鏡、FCM檢測和斑點雜交結果均顯示PcDNA3-GFP-PSA轉染的B16細胞轉染情況良好.體外細胞實驗顯示,將HSP65-PSA融閤蛋白作用于人外週血樹突狀細胞後可以明顯促進樹突狀細胞錶麵分子CD86的錶達,其上調率為52.93%.動物體內實驗顯示,HSP65-PSA融閤蛋白可以明顯抑製PSA暘性B16腫瘤細胞在小鼠體內的生長.10 μg蛋白免疫組的腫瘤體積(4.91±5.21)與對照組(10.56±6.10)相比差異有統計學意義(P<0.05).結論:HSP65-PSA融閤蛋白可以在體外活化樹突狀細胞,在小鼠體內抑製PSA暘性B16腫瘤細胞的生長.HSP65-PSA融閤蛋白可能具有應用于PSA暘性腫瘤的免疫治療作用.
목적:연구열휴극단백65(HSP65)-전렬선특이성항원융합단백재체외대인수돌상세포적활화작용이급재소서체내억제PSA양성종류세포생장적작용.방법:이용Westernblot방법대융합단백HSP65-PSA적특이성진행감정;이용공취초현미경、류식세포술(FCM)검측화반점잡교적방법대PcDNA3-GFP-PSA은정전염적B16세포진행감정;용HSP65-PSA융합단백자격래자우인외주혈적미성숙수돌상세포,관찰융합단백대수돌상세포적체외활화작용;용PcDNA3-GFP-PSA은정전염적B16세포충식C57BL/6소서,계이용HSP65-PSA융합단백래면역소서이관찰융합단백대PSA양성B16종류세포생장적체내억제작용.결과:Western blot검측현시융합단백HSP65-PSA구유PSA단백특이성.공취초현미경、FCM검측화반점잡교결과균현시PcDNA3-GFP-PSA전염적B16세포전염정황량호.체외세포실험현시,장HSP65-PSA융합단백작용우인외주혈수돌상세포후가이명현촉진수돌상세포표면분자CD86적표체,기상조솔위52.93%.동물체내실험현시,HSP65-PSA융합단백가이명현억제PSA양성B16종류세포재소서체내적생장.10 μg단백면역조적종류체적(4.91±5.21)여대조조(10.56±6.10)상비차이유통계학의의(P<0.05).결론:HSP65-PSA융합단백가이재체외활화수돌상세포,재소서체내억제PSA양성B16종류세포적생장.HSP65-PSA융합단백가능구유응용우PSA양성종류적면역치료작용.
