生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2008年
1期
14-16
,共3页
冯欣%刘刚%戴红梅%汤国营%游松
馮訢%劉剛%戴紅梅%湯國營%遊鬆
풍흔%류강%대홍매%탕국영%유송
Scytovirin%可溶性表达%多克隆抗体
Scytovirin%可溶性錶達%多剋隆抗體
Scytovirin%가용성표체%다극륭항체
目的:获得Scytovirin(SVN)蛋白及其多克隆抗体.方法:按照NCBI上公布的SVN基因序列设计合成引物,合成SVN基因,构建pET32c-SVN原核表达重组质粒,经限制性酶切分析、DNA序列测定插入片段正确;将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达;用离子交换层析法及金属亲合层析法纯化蛋白,采用Tris-Tricine系统分析;以经过纯化的蛋白为抗原免疫白兔,制备SVN多克隆抗体.结果:对表达产物进行了分离纯化,SVN纯度达到91%;用纯化的样品制备了多克隆抗体,抗血清效价为1∶102 400.结论:SVN在大肠杆菌表达系统中获得了高效可溶表达,并制备了其多克隆抗体,为进一步深入研究SVN提供了材料.
目的:穫得Scytovirin(SVN)蛋白及其多剋隆抗體.方法:按照NCBI上公佈的SVN基因序列設計閤成引物,閤成SVN基因,構建pET32c-SVN原覈錶達重組質粒,經限製性酶切分析、DNA序列測定插入片段正確;將該重組質粒轉化大腸桿菌BL21(DE3),IPTG誘導重組蛋白錶達;用離子交換層析法及金屬親閤層析法純化蛋白,採用Tris-Tricine繫統分析;以經過純化的蛋白為抗原免疫白兔,製備SVN多剋隆抗體.結果:對錶達產物進行瞭分離純化,SVN純度達到91%;用純化的樣品製備瞭多剋隆抗體,抗血清效價為1∶102 400.結論:SVN在大腸桿菌錶達繫統中穫得瞭高效可溶錶達,併製備瞭其多剋隆抗體,為進一步深入研究SVN提供瞭材料.
목적:획득Scytovirin(SVN)단백급기다극륭항체.방법:안조NCBI상공포적SVN기인서렬설계합성인물,합성SVN기인,구건pET32c-SVN원핵표체중조질립,경한제성매절분석、DNA서렬측정삽입편단정학;장해중조질립전화대장간균BL21(DE3),IPTG유도중조단백표체;용리자교환층석법급금속친합층석법순화단백,채용Tris-Tricine계통분석;이경과순화적단백위항원면역백토,제비SVN다극륭항체.결과:대표체산물진행료분리순화,SVN순도체도91%;용순화적양품제비료다극륭항체,항혈청효개위1∶102 400.결론:SVN재대장간균표체계통중획득료고효가용표체,병제비료기다극륭항체,위진일보심입연구SVN제공료재료.
