山东大学学报（医学版）
山東大學學報（醫學版）
산동대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2008年
1期
52-56
,共5页
杨雪莉%蔡可丽%高雪%吴晓莉%卓建%杨博%刘德荣%王荣
楊雪莉%蔡可麗%高雪%吳曉莉%卓建%楊博%劉德榮%王榮
양설리%채가려%고설%오효리%탁건%양박%류덕영%왕영
白内障%发病机制%内质网应激%未折叠蛋白应答%细胞凋亡
白內障%髮病機製%內質網應激%未摺疊蛋白應答%細胞凋亡
백내장%발병궤제%내질망응격%미절첩단백응답%세포조망
目的 探讨内质网应激中未折叠蛋白应答在晶状体上皮细胞(hLECs)凋亡中的作用及其与白内障发病机制的关系.方法 将hLECs分为对照组和实验A、B、C、D组,分别用0、1、2、5、10 mmol/L的同型半胱氨酸(Hcy)作用细胞24 h,应用MTT法检测不同浓度药物对细胞的增殖抑制率;应用Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡率;应用活性氧荧光探针DCFH-DA检测刺激后细胞中活性氧产物(ROS);应用GSH试剂盒检测刺激后细胞中还原型谷胱甘肽(GSH)的含量;应用Western blot技术检测刺激后细胞中的GRP78和Caspase-12的表达.结果 不同浓度的Hcy刺激晶体上皮细胞后,细胞活力呈浓度依赖性下降,其中5 mmol/L,10 mmol/L Hcy可使细胞活性下降48.3%,57.7%,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.01),并且能诱导细胞的明显凋亡;与对照组相比,C、D组细胞中ROS水平呈浓度依赖性升高,GSH含量减少,GRP78和Caspase-12表达显著升高(P均＜0.05).结论 高浓度的内质网刺激因子可刺激晶体上皮细胞产生内质网应激,并通过未折叠蛋白应答导致晶状体上皮细胞凋亡,产生白内障.
目的 探討內質網應激中未摺疊蛋白應答在晶狀體上皮細胞(hLECs)凋亡中的作用及其與白內障髮病機製的關繫.方法 將hLECs分為對照組和實驗A、B、C、D組,分彆用0、1、2、5、10 mmol/L的同型半胱氨痠(Hcy)作用細胞24 h,應用MTT法檢測不同濃度藥物對細胞的增殖抑製率;應用Hoechst33258熒光染色檢測細胞凋亡率;應用活性氧熒光探針DCFH-DA檢測刺激後細胞中活性氧產物(ROS);應用GSH試劑盒檢測刺激後細胞中還原型穀胱甘肽(GSH)的含量;應用Western blot技術檢測刺激後細胞中的GRP78和Caspase-12的錶達.結果 不同濃度的Hcy刺激晶體上皮細胞後,細胞活力呈濃度依賴性下降,其中5 mmol/L,10 mmol/L Hcy可使細胞活性下降48.3%,57.7%,與對照組相比,差異具有統計學意義(P＜0.01),併且能誘導細胞的明顯凋亡;與對照組相比,C、D組細胞中ROS水平呈濃度依賴性升高,GSH含量減少,GRP78和Caspase-12錶達顯著升高(P均＜0.05).結論 高濃度的內質網刺激因子可刺激晶體上皮細胞產生內質網應激,併通過未摺疊蛋白應答導緻晶狀體上皮細胞凋亡,產生白內障.
목적 탐토내질망응격중미절첩단백응답재정상체상피세포(hLECs)조망중적작용급기여백내장발병궤제적관계.방법 장hLECs분위대조조화실험A、B、C、D조,분별용0、1、2、5、10 mmol/L적동형반광안산(Hcy)작용세포24 h,응용MTT법검측불동농도약물대세포적증식억제솔;응용Hoechst33258형광염색검측세포조망솔;응용활성양형광탐침DCFH-DA검측자격후세포중활성양산물(ROS);응용GSH시제합검측자격후세포중환원형곡광감태(GSH)적함량;응용Western blot기술검측자격후세포중적GRP78화Caspase-12적표체.결과 불동농도적Hcy자격정체상피세포후,세포활력정농도의뢰성하강,기중5 mmol/L,10 mmol/L Hcy가사세포활성하강48.3%,57.7%,여대조조상비,차이구유통계학의의(P＜0.01),병차능유도세포적명현조망;여대조조상비,C、D조세포중ROS수평정농도의뢰성승고,GSH함량감소,GRP78화Caspase-12표체현저승고(P균＜0.05).결론 고농도적내질망자격인자가자격정체상피세포산생내질망응격,병통과미절첩단백응답도치정상체상피세포조망,산생백내장.
