南京医科大学学报(自然科学版)
南京醫科大學學報(自然科學版)
남경의과대학학보(자연과학판)
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING
2008年
2期
139-143,193
,共6页
吕志刚%卢春%秦娣%曾怡%程林%陈秀英
呂誌剛%盧春%秦娣%曾怡%程林%陳秀英
려지강%로춘%진제%증이%정림%진수영
卡波济肉瘤相关疱疹病毒%人类单纯疱疹病毒1型%白细胞介素%启动子活性
卡波濟肉瘤相關皰疹病毒%人類單純皰疹病毒1型%白細胞介素%啟動子活性
잡파제육류상관포진병독%인류단순포진병독1형%백세포개소%계동자활성
目的:分离和鉴定人类IL-10、IL-10受体(IL-10Rα)、IL-4及其受体IL-4Rα启动子序列,并分析IL-10、IL-4以及其受体的启动子在人类单纯疱疹病毒1型(HSV-1)激活卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)过程中的启动活性.方法:以人类基因组DNA为模板,PCR扩增IL-10、IL-10Rα、IL-4Rα启动子区序列,并分别克隆载入pGL-3基本载体中虫荧光素酶(Luciferase)报告基因的上游.进一步将上述构建的重组质粒与本室保存的含IL-4启动子重组质粒分别转染HSV-1感染的BCBL-1细胞,并作Luciferase活性检测.结果:分离了IL-10、IL-10Rα和IL-4Rα的启动子区域序列,并成功克隆了含启动子序列重组报告质粒;HSV-1感染的BCBL-1细胞在进一步转染了IL-10、IL-10Rα、IL-4和IL-4Rα启动子重组报告质粒后,其Luciferase值与相应的对照比较显著升高(P<0.05).结论:在BCBL-1细胞中,HSV-1可通过直接激活IL-10、IL-4以及相应受体的启动子来上调它们的表达;在HSV-1感染的BCBL-1细胞中,IL-10和IL-4可能对KSHV的裂解复制起到促进作用.
目的:分離和鑒定人類IL-10、IL-10受體(IL-10Rα)、IL-4及其受體IL-4Rα啟動子序列,併分析IL-10、IL-4以及其受體的啟動子在人類單純皰疹病毒1型(HSV-1)激活卡波濟肉瘤相關皰疹病毒(KSHV)過程中的啟動活性.方法:以人類基因組DNA為模闆,PCR擴增IL-10、IL-10Rα、IL-4Rα啟動子區序列,併分彆剋隆載入pGL-3基本載體中蟲熒光素酶(Luciferase)報告基因的上遊.進一步將上述構建的重組質粒與本室保存的含IL-4啟動子重組質粒分彆轉染HSV-1感染的BCBL-1細胞,併作Luciferase活性檢測.結果:分離瞭IL-10、IL-10Rα和IL-4Rα的啟動子區域序列,併成功剋隆瞭含啟動子序列重組報告質粒;HSV-1感染的BCBL-1細胞在進一步轉染瞭IL-10、IL-10Rα、IL-4和IL-4Rα啟動子重組報告質粒後,其Luciferase值與相應的對照比較顯著升高(P<0.05).結論:在BCBL-1細胞中,HSV-1可通過直接激活IL-10、IL-4以及相應受體的啟動子來上調它們的錶達;在HSV-1感染的BCBL-1細胞中,IL-10和IL-4可能對KSHV的裂解複製起到促進作用.
목적:분리화감정인류IL-10、IL-10수체(IL-10Rα)、IL-4급기수체IL-4Rα계동자서렬,병분석IL-10、IL-4이급기수체적계동자재인류단순포진병독1형(HSV-1)격활잡파제육류상관포진병독(KSHV)과정중적계동활성.방법:이인류기인조DNA위모판,PCR확증IL-10、IL-10Rα、IL-4Rα계동자구서렬,병분별극륭재입pGL-3기본재체중충형광소매(Luciferase)보고기인적상유.진일보장상술구건적중조질립여본실보존적함IL-4계동자중조질립분별전염HSV-1감염적BCBL-1세포,병작Luciferase활성검측.결과:분리료IL-10、IL-10Rα화IL-4Rα적계동자구역서렬,병성공극륭료함계동자서렬중조보고질립;HSV-1감염적BCBL-1세포재진일보전염료IL-10、IL-10Rα、IL-4화IL-4Rα계동자중조보고질립후,기Luciferase치여상응적대조비교현저승고(P<0.05).결론:재BCBL-1세포중,HSV-1가통과직접격활IL-10、IL-4이급상응수체적계동자래상조타문적표체;재HSV-1감염적BCBL-1세포중,IL-10화IL-4가능대KSHV적렬해복제기도촉진작용.