解放军医学杂志
解放軍醫學雜誌
해방군의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2008年
2期
190-193
,共4页
赵瑞巧%王晓凌%杜丽敏%吕文华%揣霞
趙瑞巧%王曉凌%杜麗敏%呂文華%揣霞
조서교%왕효릉%두려민%려문화%췌하
志贺毒素类%白细胞介素8%柯萨奇病毒B组3型%疫苗,DNA
誌賀毒素類%白細胞介素8%柯薩奇病毒B組3型%疫苗,DNA
지하독소류%백세포개소8%가살기병독B조3형%역묘,DNA
目的 构建融合基因DNA疫苗pcDNA3/STxB-VP1和pcDNA3/MDC-VP1,并免疫小鼠,观察其免疫效果.方法 从痢疾志贺菌PCR扩增志贺毒素B亚单位(STxB)基因片段,用RT-PcR法从小鼠脾细胞扩增巨噬细胞来源的趋化因子(MDC)基因片段.将这两个基因片段分别与柯萨奇病毒B组3型(CVB3)的衣壳蛋白VP1通过一个编码15肽的柔性接头(Linker)相连接,构建真核表达质粒peDNA3/STxB-VP1和pcDNA3/MDC-VP1.120只BAI B/c小鼠随机均分为6组,分别在胫骨前肌注射pcDNA3、pcD-NA3/STxB、pcDNA3/MDC、pcDNA3/VP1、pcDNA3/STxB-VP1和peDNA3/MDC-VP1,每3周1次,共3次.每次免疫后20d检测血清中中和抗体水平,最后1次免疫后20d用7LD50的CVB3进行致死性攻击,观察小鼠生存率.结果 成功构建了融合基因疫苗pcD-NA3/STxB-VP1和peDNAa/MDC-VP1.各组小鼠的生存率分别是10%、10%、15%、40%、20%和75%,中和抗体水平及血中病毒滴度均与生存率一致.结论 与pcDNA3/VP1相比,pcDNA3/MDC-VP1可诱导产生高水平的中和抗体,提高小鼠生存率,而peDNA3/STxB-VP1仅诱导出低水平的中和抗体,小鼠的生存率降低.
目的 構建融閤基因DNA疫苗pcDNA3/STxB-VP1和pcDNA3/MDC-VP1,併免疫小鼠,觀察其免疫效果.方法 從痢疾誌賀菌PCR擴增誌賀毒素B亞單位(STxB)基因片段,用RT-PcR法從小鼠脾細胞擴增巨噬細胞來源的趨化因子(MDC)基因片段.將這兩箇基因片段分彆與柯薩奇病毒B組3型(CVB3)的衣殼蛋白VP1通過一箇編碼15肽的柔性接頭(Linker)相連接,構建真覈錶達質粒peDNA3/STxB-VP1和pcDNA3/MDC-VP1.120隻BAI B/c小鼠隨機均分為6組,分彆在脛骨前肌註射pcDNA3、pcD-NA3/STxB、pcDNA3/MDC、pcDNA3/VP1、pcDNA3/STxB-VP1和peDNA3/MDC-VP1,每3週1次,共3次.每次免疫後20d檢測血清中中和抗體水平,最後1次免疫後20d用7LD50的CVB3進行緻死性攻擊,觀察小鼠生存率.結果 成功構建瞭融閤基因疫苗pcD-NA3/STxB-VP1和peDNAa/MDC-VP1.各組小鼠的生存率分彆是10%、10%、15%、40%、20%和75%,中和抗體水平及血中病毒滴度均與生存率一緻.結論 與pcDNA3/VP1相比,pcDNA3/MDC-VP1可誘導產生高水平的中和抗體,提高小鼠生存率,而peDNA3/STxB-VP1僅誘導齣低水平的中和抗體,小鼠的生存率降低.
목적 구건융합기인DNA역묘pcDNA3/STxB-VP1화pcDNA3/MDC-VP1,병면역소서,관찰기면역효과.방법 종이질지하균PCR확증지하독소B아단위(STxB)기인편단,용RT-PcR법종소서비세포확증거서세포래원적추화인자(MDC)기인편단.장저량개기인편단분별여가살기병독B조3형(CVB3)적의각단백VP1통과일개편마15태적유성접두(Linker)상련접,구건진핵표체질립peDNA3/STxB-VP1화pcDNA3/MDC-VP1.120지BAI B/c소서수궤균분위6조,분별재경골전기주사pcDNA3、pcD-NA3/STxB、pcDNA3/MDC、pcDNA3/VP1、pcDNA3/STxB-VP1화peDNA3/MDC-VP1,매3주1차,공3차.매차면역후20d검측혈청중중화항체수평,최후1차면역후20d용7LD50적CVB3진행치사성공격,관찰소서생존솔.결과 성공구건료융합기인역묘pcD-NA3/STxB-VP1화peDNAa/MDC-VP1.각조소서적생존솔분별시10%、10%、15%、40%、20%화75%,중화항체수평급혈중병독적도균여생존솔일치.결론 여pcDNA3/VP1상비,pcDNA3/MDC-VP1가유도산생고수평적중화항체,제고소서생존솔,이peDNA3/STxB-VP1부유도출저수평적중화항체,소서적생존솔강저.
