微生物与感染
微生物與感染
미생물여감염
JOURNAL OF MICROBES AND INFECTION
2007年
4期
219-227
,共9页
吕健%孙志%张建武%刘维全%袁世山
呂健%孫誌%張建武%劉維全%袁世山
려건%손지%장건무%류유전%원세산
猪繁殖与呼吸综合征病毒%感染性克隆%高致病性%动物回归试验
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%感染性剋隆%高緻病性%動物迴歸試驗
저번식여호흡종합정병독%감염성극륭%고치병성%동물회귀시험
目的 确定"猪高热综合征"的主要病原是否为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),为探寻高致病性病毒基因组结构和功能、高致病性蓝耳病发病机制,以及进一步研制针对后者的基因工程疫苗奠定基础.方法 根据PRRSV基因组序列设计特异性引物,分5段扩增了高致病性PRRSV JX143株的全长cDNA,将各cDNA片段克隆到pBlueScript Ⅱ SK(+)载体中,进而利用重叠区中的单酶切位点将其连接成JX143株的全长cDNA克隆pJX143和含有遗传标记Mlu Ⅰ限制性内切酶的基因组全长cDNA克隆pJX143.M.结果 全长cDNA克隆经体外合成RNA后转染MA-104细胞,均获得稳定的拯救病毒.通过比较亲本病毒与拯救病毒的病毒滴度、多步生长曲线和利用拯救病毒vJXi43进行动物回归试验,结果发现病毒学及生物学特性没有显著差异.结论 PRRSV的JX143株病毒确实是引起"猪高热综合征"的主要病原;建立了首个高致病性PRRSV的感染性cDNA克隆,证明拯救病毒与亲本病毒生物学特性相同.
目的 確定"豬高熱綜閤徵"的主要病原是否為豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV),為探尋高緻病性病毒基因組結構和功能、高緻病性藍耳病髮病機製,以及進一步研製針對後者的基因工程疫苗奠定基礎.方法 根據PRRSV基因組序列設計特異性引物,分5段擴增瞭高緻病性PRRSV JX143株的全長cDNA,將各cDNA片段剋隆到pBlueScript Ⅱ SK(+)載體中,進而利用重疊區中的單酶切位點將其連接成JX143株的全長cDNA剋隆pJX143和含有遺傳標記Mlu Ⅰ限製性內切酶的基因組全長cDNA剋隆pJX143.M.結果 全長cDNA剋隆經體外閤成RNA後轉染MA-104細胞,均穫得穩定的拯救病毒.通過比較親本病毒與拯救病毒的病毒滴度、多步生長麯線和利用拯救病毒vJXi43進行動物迴歸試驗,結果髮現病毒學及生物學特性沒有顯著差異.結論 PRRSV的JX143株病毒確實是引起"豬高熱綜閤徵"的主要病原;建立瞭首箇高緻病性PRRSV的感染性cDNA剋隆,證明拯救病毒與親本病毒生物學特性相同.
목적 학정"저고열종합정"적주요병원시부위저번식여호흡종합정병독(PRRSV),위탐심고치병성병독기인조결구화공능、고치병성람이병발병궤제,이급진일보연제침대후자적기인공정역묘전정기출.방법 근거PRRSV기인조서렬설계특이성인물,분5단확증료고치병성PRRSV JX143주적전장cDNA,장각cDNA편단극륭도pBlueScript Ⅱ SK(+)재체중,진이이용중첩구중적단매절위점장기련접성JX143주적전장cDNA극륭pJX143화함유유전표기Mlu Ⅰ한제성내절매적기인조전장cDNA극륭pJX143.M.결과 전장cDNA극륭경체외합성RNA후전염MA-104세포,균획득은정적증구병독.통과비교친본병독여증구병독적병독적도、다보생장곡선화이용증구병독vJXi43진행동물회귀시험,결과발현병독학급생물학특성몰유현저차이.결론 PRRSV적JX143주병독학실시인기"저고열종합정"적주요병원;건립료수개고치병성PRRSV적감염성cDNA극륭,증명증구병독여친본병독생물학특성상동.
