中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2007年
12期
1006-1011
,共6页
姜立%马文丽%李晋%彭翼飞%徐兵%郑文岭
薑立%馬文麗%李晉%彭翼飛%徐兵%鄭文嶺
강립%마문려%리진%팽익비%서병%정문령
抗酶%细胞增殖%细胞周期%细胞周期素D1
抗酶%細胞增殖%細胞週期%細胞週期素D1
항매%세포증식%세포주기%세포주기소D1
研究抗酶(antizyme)1对人宫颈癌HeLa细胞增殖与细胞周期的影响,并分析抗酶1对细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达影响.采用定点突变技术,将抗酶1的frameshift位点缺失,随后将突变基因重组至真核表达栽体pEGFP-N1中,鉴定后转染HeLa细胞.通过MTT法检测细胞增殖变化,流式细胞术分析抗酶1对细胞周期的影响.RT-PCR和Western印迹检测抗酶1转染对细胞周期蛋白D1基因表达的影响.酶切结果显示,抗酶1突变基因成功克隆至pEGFP-N1中.成功转染HeLa细胞后,检测结果显示,抗酶1能够减慢HeLa细胞增殖速度,并使细胞停滞于G0/G1期,细胞周期蛋白D1基因的表达同时受到抑制.实验说明,抗酶1基因能够抑制HeLa细胞增殖,通过降低细胞周期蛋白D1的表达阻滞细胞周期.
研究抗酶(antizyme)1對人宮頸癌HeLa細胞增殖與細胞週期的影響,併分析抗酶1對細胞週期蛋白D1(cyclin D1)的錶達影響.採用定點突變技術,將抗酶1的frameshift位點缺失,隨後將突變基因重組至真覈錶達栽體pEGFP-N1中,鑒定後轉染HeLa細胞.通過MTT法檢測細胞增殖變化,流式細胞術分析抗酶1對細胞週期的影響.RT-PCR和Western印跡檢測抗酶1轉染對細胞週期蛋白D1基因錶達的影響.酶切結果顯示,抗酶1突變基因成功剋隆至pEGFP-N1中.成功轉染HeLa細胞後,檢測結果顯示,抗酶1能夠減慢HeLa細胞增殖速度,併使細胞停滯于G0/G1期,細胞週期蛋白D1基因的錶達同時受到抑製.實驗說明,抗酶1基因能夠抑製HeLa細胞增殖,通過降低細胞週期蛋白D1的錶達阻滯細胞週期.
연구항매(antizyme)1대인궁경암HeLa세포증식여세포주기적영향,병분석항매1대세포주기단백D1(cyclin D1)적표체영향.채용정점돌변기술,장항매1적frameshift위점결실,수후장돌변기인중조지진핵표체재체pEGFP-N1중,감정후전염HeLa세포.통과MTT법검측세포증식변화,류식세포술분석항매1대세포주기적영향.RT-PCR화Western인적검측항매1전염대세포주기단백D1기인표체적영향.매절결과현시,항매1돌변기인성공극륭지pEGFP-N1중.성공전염HeLa세포후,검측결과현시,항매1능구감만HeLa세포증식속도,병사세포정체우G0/G1기,세포주기단백D1기인적표체동시수도억제.실험설명,항매1기인능구억제HeLa세포증식,통과강저세포주기단백D1적표체조체세포주기.
