广东林业科技
廣東林業科技
엄동임업과기
FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY OF GUANGDONG PROVINCE
2011年
3期
8-13
,共6页
湿地松%加勒比松%SRAP-PCR%体系优化%引物筛选
濕地鬆%加勒比鬆%SRAP-PCR%體繫優化%引物篩選
습지송%가륵비송%SRAP-PCR%체계우화%인물사선
采用正交设计L9(34)对影响湿地松、加勒比松SRAP反应体系的DNA浓度、dNTPs浓度、引物用量、Taq DNA聚合酶浓度4个因素进行了优化试验,结果表明:扩增反应体系5优于其他体系,即25μL体系中含有DNA 40 ng、dNTPs 1mmol/L、引物10 μmol/L、DNA聚合酶1.0U.在此基础上,通过单因素试验确定了湿地松、加勒比松SRAP反应关键因子的最适浓度,即25 μL反应体系中含有DNA 40 ng、dNTPs1 mmol/L、引物5μM及Taq DNA聚合酶1.0U.利用优化反应体系从216对引物组合中筛选出扩增条带清晰、稳定、多态性好的引物42对.优化的SRAP反应体系将为湿地松、加勒比松种质资源遗传多样性评价、分子标记辅助选择、遗传连锁图谱构建研究提供基础.
採用正交設計L9(34)對影響濕地鬆、加勒比鬆SRAP反應體繫的DNA濃度、dNTPs濃度、引物用量、Taq DNA聚閤酶濃度4箇因素進行瞭優化試驗,結果錶明:擴增反應體繫5優于其他體繫,即25μL體繫中含有DNA 40 ng、dNTPs 1mmol/L、引物10 μmol/L、DNA聚閤酶1.0U.在此基礎上,通過單因素試驗確定瞭濕地鬆、加勒比鬆SRAP反應關鍵因子的最適濃度,即25 μL反應體繫中含有DNA 40 ng、dNTPs1 mmol/L、引物5μM及Taq DNA聚閤酶1.0U.利用優化反應體繫從216對引物組閤中篩選齣擴增條帶清晰、穩定、多態性好的引物42對.優化的SRAP反應體繫將為濕地鬆、加勒比鬆種質資源遺傳多樣性評價、分子標記輔助選擇、遺傳連鎖圖譜構建研究提供基礎.
채용정교설계L9(34)대영향습지송、가륵비송SRAP반응체계적DNA농도、dNTPs농도、인물용량、Taq DNA취합매농도4개인소진행료우화시험,결과표명:확증반응체계5우우기타체계,즉25μL체계중함유DNA 40 ng、dNTPs 1mmol/L、인물10 μmol/L、DNA취합매1.0U.재차기출상,통과단인소시험학정료습지송、가륵비송SRAP반응관건인자적최괄농도,즉25 μL반응체계중함유DNA 40 ng、dNTPs1 mmol/L、인물5μM급Taq DNA취합매1.0U.이용우화반응체계종216대인물조합중사선출확증조대청석、은정、다태성호적인물42대.우화적SRAP반응체계장위습지송、가륵비송충질자원유전다양성평개、분자표기보조선택、유전련쇄도보구건연구제공기출.
