CAJ | 학술논문

目的建立用于遗传转化的青羊参组织培养系统.方法以不同外植体部位、不同消毒剂、不同消毒时间建立无菌苗;以不同外植体部位、不同激素种类及配比、不同质量浓度的2,4-D与KT诱导青羊参愈伤组织形成、继代、分化;测定青羊参对标记基因分解物庆大霉素(Gent.)的敏感性.结果以青羊参的种子及茎段做外植体,以10%次氯酸钠消毒种子20～30 min,或以0.2%HgCl2消毒茎段3 min建立无菌苗具有最好效果;青羊参的种子、根、茎、叶易于形成愈伤组织;2,4-D对青羊参愈伤组织的形成是必要的;青羊参对KT较为敏感,不论用KT诱导青羊参愈伤组织的形成,还是诱导胚芽或腋芽形成,均有较好效果;以MS为基本培养基,以2,4-D 1.0 mg/L+KT1.0 mg/L为激素配比诱导青羊参愈伤组织的形成具有较好效果;以MS+2,4-D 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L继代愈伤组织具有较好效果;以MS+KT 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L诱导种子的胚芽或茎段的腋芽萌发具有较好效果;青羊参的愈伤组织不论来源于种子,还是来源于根、茎、叶,不论使用激素6-BA,还是使用KT、ZT、2ip均未观察到愈伤组织分化形成不定芽;100 μg/mL的庆大霉素是青羊参转基因植株筛选的最佳压力.结论通过基因枪介导转基因时,选择种子或茎段在MS+2,4-D 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L培养基上萌动14 d,形成愈伤但未形成芽的材料作为基因枪轰击材料较好.
목적 건립용우유전전화적청양삼조직배양계통.방법 이불동외식체부위、불동소독제、불동소독시간건립무균묘;이불동외식체부위、불동격소충류급배비、불동질량농도적2,4-D여KT유도청양삼유상조직형성、계대、분화;측정청양삼대표기기인분해물경대매소(Gent.)적민감성.결과 이청양삼적충자급경단주외식체,이10%차록산납소독충자20～30 min,혹이0.2%HgCl2소독경단3 min건립무균묘구유최호효과;청양삼적충자、근、경、협역우형성유상조직;2,4-D대청양삼유상조직적형성시필요적;청양삼대KT교위민감,불론용KT유도청양삼유상조직적형성,환시유도배아혹액아형성,균유교호효과;이MS위기본배양기,이2,4-D 1.0 mg/L+KT1.0 mg/L위격소배비유도청양삼유상조직적형성구유교호효과;이MS+2,4-D 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L계대유상조직구유교호효과;이MS+KT 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L유도충자적배아혹경단적액아맹발구유교호효과;청양삼적유상조직불론래원우충자,환시래원우근、경、협,불론사용격소6-BA,환시사용KT、ZT、2ip균미관찰도유상조직분화형성불정아;100 μg/mL적경대매소시청양삼전기인식주사선적최가압력.결론 통과기인창개도전기인시,선택충자혹경단재MS+2,4-D 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L배양기상맹동14 d,형성유상단미형성아적재료작위기인창굉격재료교호.