中国实用神经疾病杂志
中國實用神經疾病雜誌
중국실용신경질병잡지
CHINESE JOURNAL OF PRACTICAL NERVOUS DISEASES
2008年
1期
11-14
,共4页
刀筱芳%伍雪英%李宁%徐亚欧%何进宇%龚玉来%高晋健
刀篠芳%伍雪英%李寧%徐亞歐%何進宇%龔玉來%高晉健
도소방%오설영%리저%서아구%하진우%공옥래%고진건
代谢型谷氨酸受体%TaqMan探针%real-time PCR%mRNA
代謝型穀氨痠受體%TaqMan探針%real-time PCR%mRNA
대사형곡안산수체%TaqMan탐침%real-time PCR%mRNA
目的 建立代谢型谷氨酸受体1(mGluR1)基因mRNA表达水平的TaqMan real-time PCR检测方法.方法 以β-actin为内参基因,根据GenBank中人mGluR1及β-actin基因序列,分别设计了两套特异性引物和TaqMan探针,接着对反应的退火温度、引物浓度、探针浓度、Mg2+浓度进行优化,然后以优化的条件建立相对定量标准曲线,并对该方法的稳定性进行分析.结果 mGluR1及β-actin基因的real-time PCR扩增效率分别为99.7%和100.0%;相对定量标准曲线的CT值线性范围分别为8.1～30.9和11.9～32.1,相关系数分别为0.999及1.000;批内及批间变异系数＜6.4%.结论 本研究所建立的针对mGluR1 mRNA表达水平的Taqman real-time PCR检测方法具有扩增效率高、稳定性好等特点,为进一步探索mGluR1的功能及其mRNA表达水平的变化和各种疾病发生、发展的相关性提供了方法学基础.
目的 建立代謝型穀氨痠受體1(mGluR1)基因mRNA錶達水平的TaqMan real-time PCR檢測方法.方法 以β-actin為內參基因,根據GenBank中人mGluR1及β-actin基因序列,分彆設計瞭兩套特異性引物和TaqMan探針,接著對反應的退火溫度、引物濃度、探針濃度、Mg2+濃度進行優化,然後以優化的條件建立相對定量標準麯線,併對該方法的穩定性進行分析.結果 mGluR1及β-actin基因的real-time PCR擴增效率分彆為99.7%和100.0%;相對定量標準麯線的CT值線性範圍分彆為8.1～30.9和11.9～32.1,相關繫數分彆為0.999及1.000;批內及批間變異繫數＜6.4%.結論 本研究所建立的針對mGluR1 mRNA錶達水平的Taqman real-time PCR檢測方法具有擴增效率高、穩定性好等特點,為進一步探索mGluR1的功能及其mRNA錶達水平的變化和各種疾病髮生、髮展的相關性提供瞭方法學基礎.
목적 건립대사형곡안산수체1(mGluR1)기인mRNA표체수평적TaqMan real-time PCR검측방법.방법 이β-actin위내삼기인,근거GenBank중인mGluR1급β-actin기인서렬,분별설계료량투특이성인물화TaqMan탐침,접착대반응적퇴화온도、인물농도、탐침농도、Mg2+농도진행우화,연후이우화적조건건립상대정량표준곡선,병대해방법적은정성진행분석.결과 mGluR1급β-actin기인적real-time PCR확증효솔분별위99.7%화100.0%;상대정량표준곡선적CT치선성범위분별위8.1～30.9화11.9～32.1,상관계수분별위0.999급1.000;비내급비간변이계수＜6.4%.결론 본연구소건립적침대mGluR1 mRNA표체수평적Taqman real-time PCR검측방법구유확증효솔고、은정성호등특점,위진일보탐색mGluR1적공능급기mRNA표체수평적변화화각충질병발생、발전적상관성제공료방법학기출.
