CAJ | 학술논문

北美海蓬子(Salicornia Bigelovii Torr.)是一种耐盐性极强的真盐生植物,在200 mmol/L的Na+浓度下生长,其高度和含汁量是5 mmol/L Na+浓度下生长的2倍和2.5倍.为了研究北美海蓬子耐盐的机理和分离耐盐新基因,我们构建了在盐胁迫条件下北美海蓬子基因表达差异的SSH文库.以北美海蓬子种子播种于0 mmol/L NaC1 MS液体培养基上幼苗(0号材料)的总RNA为Driver,200 mmol/L NaCl诱导24 h幼苗(2号材料)的总RNA为Tester,运用SMART PCR cDNA合成技术分别合成全长cDNA.将两种cDNA群体进行抑制差减杂交,用T/A法分别构建了盐胁迫相关基因的正向差减文库(205个克隆子)和反向差减文库(235个克隆子).通过PCR和反式Northern Dot.Blot消除假阳性和重复克隆子,得到在盐胁迫下特异表达的阳性克隆85个.对测序结果正常的81个克隆进行BLASTn分析,其中有70个cDNA序列与已经报道的其它物种的核酸序列具有较高的同源性;另外11个cDNA序列未找到有较高相似性的已知序列.81个cDNA序列中没有与北美海蓬子中已报道的核酸序列有较高的相似性,因此,所有81个克隆序列都是北美海蓬子中的新基因.
북미해봉자(Salicornia Bigelovii Torr.)시일충내염성겁강적진염생식물,재200 mmol/L적Na+농도하생장,기고도화함즙량시5 mmol/L Na+농도하생장적2배화2.5배.위료연구북미해봉자내염적궤리화분리내염신기인,아문구건료재염협박조건하북미해봉자기인표체차이적SSH문고.이북미해봉자충자파충우0 mmol/L NaC1 MS액체배양기상유묘(0호재료)적총RNA위Driver,200 mmol/L NaCl유도24 h유묘(2호재료)적총RNA위Tester,운용SMART PCR cDNA합성기술분별합성전장cDNA.장량충cDNA군체진행억제차감잡교,용T/A법분별구건료염협박상관기인적정향차감문고(205개극륭자)화반향차감문고(235개극륭자).통과PCR화반식Northern Dot.Blot소제가양성화중복극륭자,득도재염협박하특이표체적양성극륭85개.대측서결과정상적81개극륭진행BLASTn분석,기중유70개cDNA서렬여이경보도적기타물충적핵산서렬구유교고적동원성;령외11개cDNA서렬미조도유교고상사성적이지서렬.81개cDNA서렬중몰유여북미해봉자중이보도적핵산서렬유교고적상사성,인차,소유81개극륭서렬도시북미해봉자중적신기인.