微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2006年
5期
783-788,插1
,共7页
许跃强%DUAN Cheng-jie%段承杰%周权能%唐纪良%冯家勋
許躍彊%DUAN Cheng-jie%段承傑%週權能%唐紀良%馮傢勛
허약강%DUAN Cheng-jie%단승걸%주권능%당기량%풍가훈
纸浆沉淀物%细菌多样性%未培养微生物%宏基因组文库%纤维素酶
紙漿沉澱物%細菌多樣性%未培養微生物%宏基因組文庫%纖維素酶
지장침정물%세균다양성%미배양미생물%굉기인조문고%섬유소매
提取纯化造纸废水纸浆沉淀物的宏基因组DNA并构建16S rDNA文库,系统发育分析显示该环境中存在大量的未培养细菌且具有种类的多样性.以柯斯质粒为载体构建了1个含10000个克隆的宏基因组文库,文库容量为3.53×108bp.筛选文库得到2个表达内切葡聚糖酶活性的克隆、3个表达外切葡聚糖酶活性的克隆和2个表达β-葡萄糖苷酶活性的克隆.从表达不同活性的克隆中分别挑选活性最强的进行鉴定,得到3个新的纤维素酶基因umcel5L、umcel5M和umbgl3D.umcel5L、umcel5M和umbgl3D分别编码产生内切葡聚糖酶、纤维糊精酶和β-葡萄糖苷酶,其编码产物与已报道的纤维素酶一致性最高的分别为43%、48%和46%.这是第一次采用未培养方法对造纸废水纸浆沉淀物中的细菌多样性进行分析并从中克隆纤维素酶基因的报道.
提取純化造紙廢水紙漿沉澱物的宏基因組DNA併構建16S rDNA文庫,繫統髮育分析顯示該環境中存在大量的未培養細菌且具有種類的多樣性.以柯斯質粒為載體構建瞭1箇含10000箇剋隆的宏基因組文庫,文庫容量為3.53×108bp.篩選文庫得到2箇錶達內切葡聚糖酶活性的剋隆、3箇錶達外切葡聚糖酶活性的剋隆和2箇錶達β-葡萄糖苷酶活性的剋隆.從錶達不同活性的剋隆中分彆挑選活性最彊的進行鑒定,得到3箇新的纖維素酶基因umcel5L、umcel5M和umbgl3D.umcel5L、umcel5M和umbgl3D分彆編碼產生內切葡聚糖酶、纖維糊精酶和β-葡萄糖苷酶,其編碼產物與已報道的纖維素酶一緻性最高的分彆為43%、48%和46%.這是第一次採用未培養方法對造紙廢水紙漿沉澱物中的細菌多樣性進行分析併從中剋隆纖維素酶基因的報道.
제취순화조지폐수지장침정물적굉기인조DNA병구건16S rDNA문고,계통발육분석현시해배경중존재대량적미배양세균차구유충류적다양성.이가사질립위재체구건료1개함10000개극륭적굉기인조문고,문고용량위3.53×108bp.사선문고득도2개표체내절포취당매활성적극륭、3개표체외절포취당매활성적극륭화2개표체β-포도당감매활성적극륭.종표체불동활성적극륭중분별도선활성최강적진행감정,득도3개신적섬유소매기인umcel5L、umcel5M화umbgl3D.umcel5L、umcel5M화umbgl3D분별편마산생내절포취당매、섬유호정매화β-포도당감매,기편마산물여이보도적섬유소매일치성최고적분별위43%、48%화46%.저시제일차채용미배양방법대조지폐수지장침정물중적세균다양성진행분석병종중극륭섬유소매기인적보도.
